[發明專利]一種具有免疫調節活性的點柄乳牛肝菌多糖SGP2-1及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202111133125.8
• 申請日: 2021-09-27
• 公開（公告）號: CN113817076A
• 公開（公告）日: 2021-12-21
• 發明（設計）人: 李斌;曾冉華;高雄;張玉婷;吳吉莉;姚艷婷;黃倩茵
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A23L33/105;A23L33/125;A61K31/715;A61K36/07;A61P37/04
• 代理公司: 廣州藍晟專利代理事務所(普通合伙) 44452
• 代理人: 歐陽凱

本發明屬于食用菌多糖研究領域，公開了一種具有免疫調節活性的點柄乳牛肝菌多糖SGP2?1及其制備方法和應用。SGP2?1是由點柄乳牛肝菌子實體熱水浸提和分級醇沉提取，并經離子交換柱和凝膠柱分離純化得到的均一多糖，其主要重復單元的結構如下所示，重均分子量為150.75kDa。經體外免疫調節活性研究，SGP2?1可被模式識別受體TLR2識別以激活巨噬細胞，顯著增強小鼠單核巨噬細胞RAW264.7細胞活力及吞噬能力，促進小鼠單核巨噬細胞RAW264.7產生ROS、NO、細胞因子和趨化因子，以發揮免疫調節作用。本發明的多糖可作為潛在的免疫調節劑，用于功能性食品或藥物的開發。

技術領域

本發明屬于食用菌多糖研究領域，特別涉及一種具有免疫調節活性的點柄乳牛肝菌多糖SGP2-1及其制備方法和應用。

背景技術

食用菌多糖具有多種功能活性，包括免疫調節、抗腫瘤、抗氧化、抗炎、降血糖血脂等，其中，免疫調節活性是多糖被研究得最廣泛、最深入的生理活性，多糖可通過直接或間接方式激活巨噬細胞、T/B淋巴細胞、促進和補充干擾素、白介素、腫瘤壞死因子等多種方式來調節和改善機體的免疫系統，并與其他抗癌、抗病毒等功能相關，因此多糖在功能性食品以及藥物開發上具有重要應用價值。

點柄乳牛肝菌(Suillus granulatus)，別名松蘑、栗殼牛肝菌，屬于擔子菌門(Basidiomycota)、層菌綱(Hymenomycetes)、牛肝菌目(Boletales)，是油松林地的常見外生菌根，其廣泛分布于云南、四川、貴州、黑龍江等省區，點柄乳牛肝菌含有多糖、麥角固醇、人體必需氨基酸、微量元素等多種生物活性物質，具有抗腫瘤、抗氧化、抗菌、抗病毒等多種功能活性。但目前對點柄乳牛肝菌多糖的鏈結構解析及免疫調節活性未做深入研究。

發明內容

為了克服現有技術的缺點和不足，本發明的首要目的在于提供一種具有免疫調節活性的點柄乳牛肝菌多糖。

本發明的另一目的在于提供一種上述具有免疫調節活性的點柄乳牛肝菌多糖的制備方法；本發明以點柄乳牛肝菌子實體為研究對象，通過熱水浸提和分級醇沉提取，經DEAE離子交換柱以及分子篩進行分離純化并研究其生物活性，解析了點柄乳牛肝菌多糖SGP2-1新成分的單糖組成、糖苷鍵連接方式、鏈結構等。

本發明的再一目的在于提供一種上述具有免疫調節活性的點柄乳牛肝菌多糖的應用。

本發明的目的通過下述技術方案實現：

一種具有免疫調節活性的點柄乳牛肝菌多糖SGP2-1，該點柄乳牛肝菌多糖SGP2-1的主要重復單元的結構如下所示，重均分子量為150.75kDa：

所述點柄乳牛肝菌多糖SGP2-1的糖含量為94.84wt％。

所述點柄乳牛肝菌多糖SGP2-1主要由摩爾比為2.4:28.2:1.0的甘露糖、葡萄糖和木糖組成。

上述的點柄乳牛肝菌多糖SGP2-1的制備方法，包括以下步驟：

(1)將粉碎過篩的點柄乳牛肝菌粉末脫脂處理，干燥后得到點柄乳牛肝菌脫脂粉末；

(2)向點柄乳牛肝菌脫脂粉末中加去離子水，提取多次，過濾后合并上清液，減壓濃縮，得濃縮液；

(3)濃縮液經分級醇沉、復溶沉淀、除蛋白、透析、冷凍干燥后獲得粗多糖凍干粉；

(4)取粗多糖凍干粉配置成粗多糖溶液，經離子交換柱分離洗脫，苯酚硫酸法測定，收集目標組分峰洗脫產物，經濃縮、透析、冷凍干燥后獲得SGP2組分；

(5)將SGP2組分經分子篩進一步分離，采用苯酚-硫酸法檢測多糖含量，收集目標組分峰洗脫產物，合并后的溶液經濃縮、透析、冷凍干燥后得到點柄乳牛肝菌多糖SGP2-1。