[發明專利]磁微粒化學發光檢測試劑盒及其制備方法和應用

在審

• 申請號: 202111131194.5
• 申請日: 2021-09-26
• 公開（公告）號: CN113933521A
• 公開（公告）日: 2022-01-14
• 發明（設計）人: 朱明月;張追峰;張稱意;陳志瓊;朱撮絲
• 申請（專利權）人: 北京貝爾醫療設備有限公司
• 主分類號: G01N33/74
• 分類號: G01N33/74;G01N33/577;G01N33/574;G01N33/543;G01N33/535;G01N33/533;G01N21/76
• 代理公司: 北京悅和知識產權代理有限公司 11714
• 代理人: 司麗春;劉青霞

本發明實施例涉及一種磁微粒化學發光檢測試劑盒及其制備方法和應用，涉及檢測領域，包括Anti?FITC羊多抗包被的磁珠、ALP標記的第一胃泌素釋放肽前體單克隆抗體、FITC標記的第二胃泌素釋放肽前體單克隆抗體、含有ProGRP重組抗原的標準品；其中，所述第一、第二胃泌素釋放肽前體單克隆抗體為識別ProGRP抗原分子不同表位的單克隆抗體。本發明為磁微粒化學發光免疫法，采用ALP酶促發光，引用了FITC和Anti?FITC對，并對制備方法及稀釋液進行了改進，極大的提高產品的靈敏度、特異性和穩定性，降低了成本，解決了現有試劑盒準確度差、線性范圍差等性能問題，解決了手動操作帶來的人為誤差，實現全自動反應，操作簡單，整個反應周期短。

技術領域

本發明涉及檢測領域，特別涉及一種磁微粒化學發光檢測試劑盒、磁微粒化學發光檢測試劑盒的制備方法及應用。

背景技術

公開于該背景技術部分的信息僅僅旨在增加對本發明的總體背景的理解，而不應當被視為承認或以任何形式暗示該信息構成已為本領域一般技術人員所公知的現有技術。

胃泌素釋放肽(GRP)最早是1978年從豬胃細胞分離出來的一種胃腸激素，它由27個氨基酸組成，具有促胃泌素分泌作用，ProGRP是GRP的前體結構，普遍存在于非胃竇組織、神經纖維、腦和肺的神經內分泌細胞中。ProGRP因部分氨基酸殘基的不同分為3種分子亞型(ProGRP31-125、ProGRP31-118、ProGRP31-115)，但它們C-末端均有共同片段ProGRP31-98。研究發現，SCLC患者的腫瘤細胞能合成和釋放GRP，并通過自分泌或細胞間的相互作用參與腫瘤的生長、轉移過程。目前ProGRP作為SCLC(小細胞肺癌)的早期診斷、療效判斷及預后分析的指標。相比NSE，ProGRP有更高的敏感性和特異性。ProGRP與其它腫瘤標志物尤其是NSE聯合運用能提高診斷率，并有助于判斷治療效果和預后，ProGRP另外可用于SCLC(小細胞肺癌)和NSCLC(非小細胞型肺癌)的鑒別。

目前對于ProGRP的體外診斷有放射免疫法(RIA)、酶免疫法(主要為ELISA)、化學發光法(CLIA)等，由于放射免疫法的物質放射性和酶免法靈敏度低等各種缺陷，將會逐漸被淘汰，化學發光法將成為主流。RIA因存在著放射性輻射和標記物放射衰變的問題，污染問題嚴重，試劑有效期短，操作復雜，極大地影響了其臨床使用。ELISA因其傳統的固相載體多為酶標板，固/液相反應接觸面積小，反應不徹底，測量結果變異較大，空白限也較高，所以在目前對定量檢測要求越來越高的情況下，其使用逐漸受到限制。

發明內容

發明目的

本發明的目的在于提供一種磁微粒化學發光檢測試劑盒、磁微粒化學發光檢測試劑盒的制備方法及應用，本發明將化學發光分析技術與磁性微粒分離技術相結合，采用FITC和ALP分別標記抗體，以直徑3μm的偶聯有抗FITC抗體的超順磁性微粒作為分離試劑。ALP催化底物發光后，通過儀器測量發光強度。該技術繼承了以ELISA為代表的傳統免疫檢測技術、無放射性污染、操作簡便等優點，同時由于采用了磁微粒作為分離載體，用ALP作為標記酶，選用低空白限發光底物。試劑盒在空白限、線性范圍、檢測重復性等性能方面有了全面的提高。

解決方案

為實現本發明目的，本發明實施例提供了一種磁微粒化學發光檢測試劑盒，包括Anti-FITC羊多抗包被的磁珠、ALP標記的第一胃泌素釋放肽前體單克隆抗體、FITC標記的第二胃泌素釋放肽前體單克隆抗體、含有ProGRP重組抗原的標準品；

其中，所述第一、第二胃泌素釋放肽前體單克隆抗體為識別ProGRP抗原分子不同表位的單克隆抗體。

本發明的Anti-FITC羊多抗是指Anti-FITC抗原羊多克隆抗體。