[發(fā)明專利]一種CHI3L1抗原、抗體及預(yù)測自體動靜脈內(nèi)瘺失功的試劑盒

在審

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• 申請日: 2021-09-26
• 公開（公告）號: CN113735958A
• 公開（公告）日: 2021-12-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 余旭亮;李志會
• 申請（專利權(quán)）人: 安徽恩禾生物技術(shù)有限公司
• 主分類號: C07K14/47
• 分類號: C07K14/47;C07K16/18;C07K1/04;C07K14/795;G01N33/68;G01N33/577;G01N33/543
• 代理公司: 合肥律眾知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 34147
• 代理人: 殷娟

1.一種CHI3L1抗原表位肽，其特征在于，包括CHI3L1抗原表位肽Ⅰ和CHI3L1抗原表位肽Ⅱ，

所述CHI3L1抗原表位肽Ⅰ的氨基酸鏈片段Ⅰ為：

Cys-Cys-Cys-Thr-Cys-Thr-Cys-Ala-Cys-Cys-Ala，

所述CHI3L1抗原表位肽Ⅱ的氨基酸鏈片段Ⅱ?yàn)椋?/p>

Ala-Thr-Gln-Cys-Cys-Ala-Thr-Cys-Ala-Ala。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種CHI3L1抗原表位肽，其特征在于，將所述氨基酸鏈片段Ⅰ通過固相法合成所述CHI3L1抗原表位肽Ⅰ，將所述氨基酸鏈片段Ⅱ通過固相法合成所述CHI3L1抗原表位肽Ⅱ。

3.一種CHI3L1抗原，其特征在于，包括：通過使用權(quán)利要求2所述的CHI3L1抗原表位肽Ⅰ與載體蛋白KLH偶聯(lián)制備CHI3L1抗原Ⅰ；通過使用權(quán)利要求2所述的CHI3L1抗原表位肽Ⅱ與載體蛋白KLH偶聯(lián)制備CHI3L1抗原Ⅱ。

4.一種CHI3L1抗體，其特征在于，包括：由權(quán)利要求3所述的CHI3L1抗原Ⅰ制備的單克隆抗體Ⅰ；由權(quán)利要求3所述的CHI3L1抗原Ⅱ制備的單克隆抗體Ⅱ。

5.一種預(yù)測自體動靜脈內(nèi)瘺失功的試劑盒，其特征在于，包括權(quán)利要求4所述的單克隆抗體Ⅰ和單克隆抗體Ⅱ。

6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種預(yù)測自體動靜脈內(nèi)瘺失功的試劑盒，其特征在于，包括單克隆抗體Ⅰ或單克隆抗體Ⅱ制備的CHI3L1抗體微孔酶標(biāo)板，所述CHI3L1抗體微孔酶標(biāo)板的制備方法為：

首先選用單克隆抗體Ⅰ或單克隆抗體Ⅱ任一種，用1XPH＝7.4的PBS緩沖液將其配置成0.5～1.5ng/ml的溶液A；

然后將溶液A滴至微孔酶標(biāo)板之內(nèi)，再將微孔酶標(biāo)板放置于37℃培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)1.5～2h；

然后取出，用2％的BSA進(jìn)行封閉，封閉完成后取出，并用1XPH＝7.4的PBS緩沖液洗滌，之后干燥0.5～1h，備用。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種預(yù)測自體動靜脈內(nèi)瘺失功的試劑盒，其特征在于，包括單克隆抗體Ⅰ或單克隆抗體Ⅱ制備的CHI3L1檢測抗體，所述CHI3L1檢測抗體的制備方法為：

首先選用單克隆抗體Ⅰ或單克隆抗體Ⅱ中的一種，且確保與CHI3L1抗體微孔酶標(biāo)板制備時選用的CHI3L1抗體不同，然后將選用的抗體進(jìn)行稀釋，再取稀釋后抗體與生物素偶聯(lián)，混合旋轉(zhuǎn)2h；

然后將偶聯(lián)后溶液倒入透析袋中，在1XPH＝7.4的PBS緩沖液中4℃恒溫下透析24h，期間換透析液4次，之后收取透析袋內(nèi)溶液，即獲得高濃度CHI3L1檢測抗體；

最后配置檢測抗體保存液；然后將獲得的高濃度檢測抗體用檢測抗體保存液稀釋配制成0.2～1.0ng/ml的溶液待用。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種預(yù)測自體動靜脈內(nèi)瘺失功的試劑盒，其特征在于，所述生物素的體積為26ul～60ul，生物素的濃度為1umol/L～10mmol/L；

與生物素偶聯(lián)的稀釋抗體體積為1ml，稀釋抗體濃度為150ug/ml～2mg/ml；

所述檢測抗體保存液的配方為：2.2～5.4g的NaH₂PO₄，22.15～31.08g的Na₂HPO₄·12H₂O，酪蛋白3～10g、0.15～0.35g的tween20、蒸餾水1L。