[發(fā)明專利]一種丙環(huán)唑半抗原及其制備方法和應用

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202111125286.2
• 申請日: 2021-09-24
• 公開（公告）號: CN113698394A
• 公開（公告）日: 2021-11-26
• 發(fā)明（設計）人: 華修德;王鳴華;李姣;丁園;陳賀
• 申請（專利權）人: 南京農(nóng)業(yè)大學
• 主分類號: C07D405/06
• 分類號: C07D405/06;C07K14/765;C07K14/77;C07K16/44;G01N33/53;G01N33/577;G01N33/58
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1.一種丙環(huán)唑半抗原，其特征在于，其分子結構式如下式I所示：

2.一種制備如權利要求1所述的丙環(huán)唑半抗原的制備方法，其制備步驟如下：

步驟1)1.52g N-溴代琥珀酰亞胺與2g 2-氯-4-溴-苯乙酮加入12mL乙腈中，在12℃的條件下攪拌反應10分鐘；隨后2.95g對甲苯磺酸加入上述混合液中，并在15-80℃的條件下攪拌反應1.17小時；反應得到的產(chǎn)物通過硅膠柱純化，用體積比為100∶1到10∶1的石油醚-乙酸乙酯洗脫分離，得產(chǎn)物1，

步驟2)4g產(chǎn)物1與2g 1，2-戊二醇加入24mL甲苯中，然后加入12mL正丁醇和1.1g對甲苯磺酸，上述混合物在135℃下攪拌反應15h；反應結束后其產(chǎn)物通過硅膠柱純化，用體積比為100∶1到10∶1的石油醚-乙酸乙酯洗脫分離，得產(chǎn)物2，

步驟3)1.39g KOH和0.73g 1H-1，2，4-苯三唑溶于14mL DMSO中，將2.8g產(chǎn)物2在45℃條件下加入上述混合物中，該混合物在135℃攪拌反應15h；反應得到的產(chǎn)物通過硅膠柱純化，用體積比為100∶1到10∶1的石油醚-乙酸乙酯洗脫分離，得產(chǎn)物3，

步驟4)1.77g產(chǎn)物3溶于7.5mL四氫呋喃中，5.56g三乙胺和0.16g雙(三苯基膦)氯化鈀加入上述溶液；隨后0.087g CuI也加入上述溶液中，在CuI加入前后需用氮氣凈化混合溶液三次；然后1.03g 4-戊炔酸甲酯加入到混合溶液中并用氮氣凈化三次；15℃攪拌10min后，0.087g CuI加入到混合溶液中并于75℃條件下持續(xù)攪拌12h；反應結束后，產(chǎn)物通過硅膠柱純化，用體積比為50∶1到1∶1的石油醚-乙酸乙酯洗脫分離，得產(chǎn)物4，

步驟5)1.77g產(chǎn)物4和0.096g二氧化鉑加入20mL乙酸乙酯中，用氫氣凈化三次后，上述混合物在30℃，氫氣壓強50psi條件下攪拌反應6h；反應結束后產(chǎn)物通過硅膠柱純化，用體積比為100∶1到10∶1的石油醚-乙酸乙酯洗脫分離，得產(chǎn)物5，

步驟6)1.2g產(chǎn)物5與0.12g單水氫氧化鋰加入6.5mL四氫呋喃并于15-25℃條件下攪拌反應15h；反應結束后產(chǎn)物通過硅膠柱純化，用體積比為100∶1到10∶1的石油醚-乙酸乙酯洗脫分離，獲得無色油狀的丙環(huán)唑半抗原。

3.一種丙環(huán)唑的人工抗原，其特征在于，所述丙環(huán)唑人工抗原包括丙環(huán)唑免疫抗原和丙環(huán)唑包被抗原，所述丙環(huán)唑人工抗原是載體蛋白和權利要求1所述的丙環(huán)唑半抗原偶聯(lián)得到的偶聯(lián)物，所述載體蛋白為牛血清白蛋白或卵清蛋白。

4.一種丙環(huán)唑單克隆抗體，其特征在于，所述的單克隆抗體特異性識別權利要求1所述的丙環(huán)唑半抗原或權利要求3所述的丙環(huán)唑人工抗原。

5.一種權利要求4所述的丙環(huán)唑單克隆抗體在檢測丙環(huán)唑殘留中的應用。