[發(fā)明專利]一種蜂毒的精制方法、注射用蜂毒制劑及其制備方法

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202111115519.0
• 申請日: 2021-09-23
• 公開（公告）號: CN113768957B
• 公開（公告）日: 2023-07-21
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 胡衛(wèi)國;任風(fēng)芝;趙倩;劉建芬;李麗紅;張雪霞;李彥樸;張向彬;梁鳳林;魏松波;王彩肖;李美琳;馬永水;代振冀
• 申請（專利權(quán)）人: 華北制藥華坤河北生物技術(shù)有限公司;華北制藥股份有限公司
• 主分類號: A61K35/64
• 分類號: A61K35/64;A61K9/00;A61K9/19;A61K47/12;A61K47/02;A61P29/00;A61P19/02;A61P19/08;A61P25/02
• 代理公司: 石家莊國為知識產(chǎn)權(quán)事務(wù)所 13120
• 代理人: 李坤

本發(fā)明涉及藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域，具體公開一種蜂毒的精制方法、注射用蜂毒制劑及其制備方法。蜂毒粗品的精制方法包括：將蜂毒粗品加入純化水中，分散均勻，離心，調(diào)節(jié)離心液的pH為3.0～4.0，靜置1h～2h，過濾；然后調(diào)節(jié)濾液pH為4.5～5.5，過濾，得蜂毒濾液；將蜂毒濾液用截留分子量大于500Da的超濾膜進行恒容超濾，加水量為所述蜂毒濾液體積的8～10倍時，開始濃縮，待濾余液體積為所述蜂毒濾液體積的50％～60％時，停止?jié)饪s，收集濾余液，得蜂毒超濾液；將蜂毒超濾液過濾除菌、凍干、粉碎，得精制蜂毒。將制備所得的精制蜂毒直接用于制備臨床注射用凍干制劑，可顯著提高蜂毒制劑的穩(wěn)定性，具有廣闊的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及藥物制劑技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種蜂毒的精制方法、注射用蜂毒制劑及其制備方法。

背景技術(shù)

蜂毒是蜜蜂毒腺和副腺分泌的一種微黃色透明液體，由多肽類、酶類和生物胺等物質(zhì)組成。蜂毒在民間用于醫(yī)療保健歷史悠久，現(xiàn)代醫(yī)學(xué)研究證實，蜂毒具有抗炎和鎮(zhèn)痛作用，用于治療風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎、強直性脊椎炎等風(fēng)濕性疾病、周圍神經(jīng)炎肌神經(jīng)痛等疾病有確切的療效。然而，蜂毒中含有的大分子量的酶類物質(zhì)以及小分子量的胺類物質(zhì)，容易造成過敏和刺激性疼痛等不良反應(yīng)，極大地限制了蜂毒制劑在臨床上的應(yīng)用。注射用精制蜂毒是將全蜂毒純化精制、凍干而制成的一種新型抗風(fēng)濕藥物，其優(yōu)點是降低了注射用全蜂毒的過敏性、刺激性等不良反應(yīng)。

目前，常用的蜂毒精制方法主要為：將蜂毒溶于水后離心分離，向離心液中加入丙酮靜置沉淀，將沉淀物用醋酸溶液溶解后采用葡聚糖凝膠層析柱進行分離純化，向洗脫液中加入活性炭過濾，濾液冷凍干燥，即得精制蜂毒。該方法存在操作繁瑣、精制蜂毒純度較低的缺點，且由于蜂毒不穩(wěn)定，由其制備成蜂毒制劑容易造成澄清度與含量不穩(wěn)定、產(chǎn)品貯存期短等問題。因此，研發(fā)一種蜂毒的精制方法以提高蜂毒的純度，以及研發(fā)一種貯存期長、質(zhì)量穩(wěn)定的蜂毒制劑，對于擴大蜂毒的臨床應(yīng)用具有十分重要的意義。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有精制方法得到的蜂毒純度較低，以及蜂毒制劑存在的穩(wěn)定性較差的問題，本發(fā)明提供一種蜂毒的精制方法、注射用蜂毒制劑及其制備方法。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明提供的技術(shù)方案是：

一種蜂毒的精制方法，包括如下步驟：

步驟a，將蜂毒粗品加入純化水中，分散均勻，離心，得蜂毒離心液；

步驟b，調(diào)節(jié)所述蜂毒離心液的pH為3.0～4.0，靜置1h～2h，過濾，得第一濾液；然后調(diào)節(jié)所述第一濾液的pH為4.5～5.5，過濾，得第二濾液；

步驟c，將所述第二濾液用截留分子量大于500Da的超濾膜進行恒容超濾，加水量為所述第二濾液體積的8～10倍時，開始濃縮，待濾余液體積為所述第二濾液體積的50％～60％時，停止?jié)饪s，收集濾余液，得蜂毒超濾液；

步驟d，將所述蜂毒超濾液過濾除菌、凍干、粉碎，得精制蜂毒。

相對于現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明提供的蜂毒的精制方法，通過將蜂毒粗品溶于純化水后離心去除水不溶雜質(zhì)，然后調(diào)節(jié)離心液的pH為3.0～4.0，可使蜂毒粗品中的部分雜質(zhì)在此pH條件下沉淀除去，同時此pH條件還可使病毒滅活，再將pH調(diào)節(jié)為4.5～5.5，有利于提高蜂毒的穩(wěn)定性；最后采用恒容超濾的方法除去離子以及組胺等小分子雜質(zhì)，最終得到含量可達(dá)96％以上的精制蜂毒。

本發(fā)明僅通過離心、調(diào)節(jié)pH以及超濾等簡單工藝就可將蜂毒粗品中的致敏物質(zhì)和無效雜質(zhì)分離除去，實現(xiàn)快速、大量生產(chǎn)精制蜂毒產(chǎn)品的目的，產(chǎn)品純度可達(dá)到96％以上，且制備得到的精制蜂毒產(chǎn)品穩(wěn)定性較高，可直接用于制備臨床注射用凍干制劑；除此之外，本發(fā)明提供的蜂毒的精制方法，無需丙酮靜置沉淀，也無需采用葡聚糖凝膠層析柱進行分離純化，避免了大量有機溶劑的使用，提高了精制蜂毒臨床用藥的安全性，且避免了有機廢水的產(chǎn)生，更加綠色環(huán)保，生產(chǎn)成本低，具有極高的推廣應(yīng)用價值。