[發明專利]一種抑菌型芽孢桿菌及其固體發酵方法

在審

• 申請號: 202111114525.4
• 申請日: 2021-09-23
• 公開（公告）號: CN113832059A
• 公開（公告）日: 2021-12-24
• 發明（設計）人: 楊小進;劉旭樂;李保民;黃慶周;王春芳;李振田;李旺;曾慶勛;鮑佳梅;趙向陽;范收武
• 申請（專利權）人: 洛陽歐科拜克生物技術股份有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A23K10/18;A61K35/742;A61P31/04;C12R1/07
• 代理公司: 成都市鼎宏恒業知識產權代理事務所(特殊普通合伙) 51248
• 代理人: 吳錦德

1.一種抑菌型芽孢桿菌，其特征在于，所述的抑菌型芽孢桿菌保藏地點為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心；保藏時間為2021年4月6日；保藏登記入冊編號為CGMCC No.22124。

2.根據權利要求1所述的抑菌型芽孢桿菌，其特征在于，所述的抑菌型芽孢桿菌參據生物材料為OKX101。

3.根據權利要求1所述的抑菌型芽孢桿菌的固體發酵方法，其特征在于，包括如下步驟：

步驟1)菌種活化；

步驟2)制備一級種子；

步驟3)制備二級種子罐；

步驟4)撒制備三級種子罐；

步驟5)固體發酵物料的滅菌；

步驟6)固體發酵。

4.根據權利要求3所述的液體發酵步驟，其特征在于，其步驟具體為，步驟1)菌種活化：

將OKX101(保藏號為GCMCC22124)的甘油管通過劃線接入到LB固體的平板上，37℃倒置培養18-24h，然后挑取單菌落接入到LB液體搖瓶中，37℃、200r/min搖床培養12-16h左右，然后將其稀釋涂布到LB平板，37℃倒置培養12-18h，作為種子平板；

步驟2)制備一級種子

用接種環從種子平板上挑取單菌落接入到裝有LB培養基中的三角搖瓶中，30-40℃靜置培養12-18h，作為一級種子搖瓶；

步驟3)制備二級種子罐

按照1～10％的比例接入到裝有LB液體培養基的種子罐中，裝液量為20-40L，發酵溫度30-40℃、攪拌轉速150-250轉/min，培養12-18h，作為二級種子罐；

步驟4)制備三級種子罐

按照1～10％的比例接入到裝有LB液體培養基的種子罐中，裝液量為1000-2000L，發酵溫度30-40℃、攪拌轉速150-250轉/min，培養12-18h，作為三級種子罐；

步驟5)固體發酵物料的滅菌

固體發酵物料：玉米粉、麩皮、豆粕、稻殼粉、氯化鈉、磷酸氫二鉀、磷酸二氫鉀、硫酸鎂、硫酸錳、碳酸鈣；原料當以kg計，通過調制器121℃滅菌5～15min，保質器保溫5～15min，待溫度冷卻到50℃以下，等待接種；

步驟6)固體發酵

按照10-40％的比例將三級種子接入到滅菌冷卻后的固體原料中，攪拌均勻，然后通過傳送帶傳入到凈化的發酵房間，通過翻料和通氣控制溫度為30-40℃，發酵24-48h。

5.根據權利要求4所述的固體發酵方法，其特征在于，所述的固體發酵物料以重量計，具體為：玉米粉100-500份、麩皮100-300份、豆粕10-50份、稻殼粉100-300份、氯化鈉1-5份、磷酸氫二鉀0-5份、磷酸二氫鉀0-5份、硫酸鎂1-5份、硫酸錳0-0.5份、碳酸鈣10-20份。

6.根據權利要求4所述的固體發酵方法，其特征在于，所述的固體發酵方法還包括步驟7)烘干及其粉碎；具體為，將氣流干燥的設置條件為：進風溫度120℃-170℃，出風溫度為65℃-90℃，用氣流干燥設備將發酵好的物料烘干和粉碎，可得到既保留大量活菌同時又有很強抑菌效果的產品，其活菌數可達1.0-9.9×10⁹cfu/g。

7.根據權利要求1所述抑菌型芽孢桿菌的應用，其特征在于，所述的抑菌型芽孢桿菌用于大腸桿菌的抑菌。

8.根據權利要求1所述抑菌型芽孢桿菌的應用，其特征在于，所述的抑菌型芽孢桿菌用于沙門氏菌的抑菌。

9.據權利要求1所述抑菌型芽孢桿菌的應用，其特征在于，所述的抑菌型芽孢桿菌用于金黃色葡萄球菌的抑菌。

10.據權利要求1所述抑菌型芽孢桿菌的應用，其特征在于，所述的抑菌型芽孢桿菌用于產氣莢膜梭菌的抑菌。