[發明專利]一種基于液相色譜-串聯質譜同位素內標法測定香辛料中食源性興奮劑的方法

有效

• 申請號: 202111101648.4
• 申請日: 2021-09-18
• 公開（公告）號: CN113820415B
• 公開（公告）日: 2023-10-24
• 發明（設計）人: 張海超;艾連峰;張婧雯;王敬;李瑋;魏欣欣;劉慧玲;劉寶如
• 申請（專利權）人: 石家莊海關技術中心
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/72;G01N30/86
• 代理公司: 北京睿智保誠專利代理事務所(普通合伙) 11732
• 代理人: 周新楣

本發明涉及食源性興奮劑檢測技術領域，尤其涉及一種基于液相色譜?串聯質譜同位素內標法測定香辛料中食源性興奮劑的方法。本發明的方法包括如下步驟：(1)香辛料與內標液混合，得到混合液；(2)在混合液中加入提取液，混勻，離心取上清得到香辛料提取液；(3)香辛料提取液于OasisMCX固相萃取柱上進行凈化處理，得到的洗脫液于39～41℃下氮吹干，復溶劑復溶，過膜，得到待測香辛料；(4)利用液相色譜?串聯質譜系統測定待測香辛料中興奮劑的峰面積，根據標準曲線，計算得到香辛料中食源性興奮劑的含量。此方法能同時檢測內源性甲烏藥堿和曲托喹酚，并且準確靈敏。

技術領域

本發明涉及食源性興奮劑檢測技術領域，尤其涉及一種基于液相色譜- 串聯質譜同位素內標法測定香辛料中食源性興奮劑的方法。

背景技術

食源性興奮劑是指來源于食品中的興奮劑，依據來源可劃分為內源性及外源性興奮劑。部分食品中天然存在興奮劑成分，這些成分于動植物體內天然存在或產生，即內源性興奮劑成分，比如去甲烏藥堿和曲托喹酚均為四氫異喹啉類生物堿，該類生物堿在自然界分布廣泛，主要分布在木蘭科、樟科、馬兜鈴科、毛茛科、小檗科、防己科、罌粟科等數10種植物類群中。

目前關于曲托喹酚的檢測僅見關于人體尿液的研究報道。對于去甲烏藥堿檢測研究報道較多，檢測基質有生物樣品、中草藥、植物性樣品和膳食補充劑。對于香辛料中去甲烏藥堿的檢測近年開始有了一些研究，主要包括液相色譜-電化學法、液相色譜-串聯質譜法。液相色譜-電化學法雖然可消除復雜樣品中的大部分非電活性物質的干擾，但是靈敏度差，無法滿足監測需求。液相色譜-串聯質譜法大多采用基質標準曲線外標法對化合物進行定量，而去甲烏藥堿為內源性藥物，對于某些陽性基質樣品難以配制空白基質標準曲線從而無法實現對化合物的準確定量。還有少數的液相色譜-串聯質譜法采用內標法對化合物進行測定，但是其方法中的凈化方式會對去甲烏藥堿有一定吸附，極易造成檢測數據不準確的現象發生。現有技術并未發現一種靈敏、準確的能同時檢測香辛料樣品中去甲烏藥堿和曲托喹酚的方法。

發明內容

本發明的目的在于提供一種靈敏、準確的能同時檢測香辛料樣品中去甲烏藥堿和曲托喹酚的方法。

為了實現上述發明目的，本發明提供以下技術方案：

本發明提供了一種基于液相色譜-串聯質譜同位素內標法測定香辛料中食源性興奮劑的方法，包括如下步驟：

(1)香辛料與內標液混合，得到混合液；

(2)在混合液中加入提取液，混勻，離心取上清得到香辛料提取液；

(3)香辛料提取液于Oasis MCX固相萃取柱上進行凈化處理，得到的洗脫液于39～41℃下氮吹干，復溶劑復溶，過膜，得到待測香辛料；

(4)利用液相色譜-串聯質譜系統測定待測香辛料中興奮劑的峰面積，根據標準曲線，計算得到香辛料中食源性興奮劑的含量。

作為優選，香辛料與內標液的質量體積比為1g:49～51μL；

內標液為D4-去甲烏藥堿和D9-曲托喹酚的混合液；

D4-去甲烏藥堿的質量濃度為10ng/mL；

D9-曲托喹酚的質量濃度為10ng/mL。

作為優選，提取液的加入量與香辛料的體積質量比為9.5～10.5mL:1g；

提取液為0.4～0.6％甲酸乙醇溶液；

0.4～0.6％甲酸乙醇溶液中0.4～0.6％甲酸與乙醇的體積比為1:198～200。

作為優選，混勻的方式為均質混勻；

均質的轉速為9000～11000r/min；

均質的時間為0.8～1.2min；