[發明專利]一種富硒鐵皮石斛原球莖懸浮培養方法

在審

• 申請號: 202111093048.8
• 申請日: 2021-09-17
• 公開（公告）號: CN113711919A
• 公開（公告）日: 2021-11-30
• 發明（設計）人: 韓素菊;梅闖
• 申請（專利權）人: 綿陽師范學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 西安研創天下知識產權代理事務所(普通合伙) 61239
• 代理人: 陳明星

1.一種富硒鐵皮石斛原球莖懸浮培養方法，其特征在于，包括以下步驟：

步驟1：疏松鐵皮石斛原球莖的誘導；

步驟2：經誘導后，選擇生長良好、大小均一且結構疏松的鐵皮石斛原球莖進行富硒懸浮培養。

2.根據權利要求1所述的一種富硒鐵皮石斛原球莖懸浮培養方法，其特征在于，在步驟1中，鐵皮石斛原球莖繼代于固體MS培養基中，在培養溫度為25±2℃、光照周期為12h/d、光照強度為2000lx的條件下進行培養，連續繼代3次。

3.根據權利要求2所述的一種富硒鐵皮石斛原球莖懸浮培養方法，其特征在于，所述固體MS培養基為MS培養基+1～2.5mg·L^-16-BA+0.25～1.0mg·L^-1NAA，pH值為5.8。

4.根據權利要求3所述的一種富硒鐵皮石斛原球莖懸浮培養方法，其特征在于，所述固體MS培養基為MS培養基+2.0mg·L^-16-BA+0.5mg·L^-1NAA，pH值為5.8。

5.根據權利要求1所述的一種富硒鐵皮石斛原球莖懸浮培養方法，其特征在于，在步驟2中，富硒懸浮培養鐵皮石斛原球莖包括以下步驟：

在步驟1連續繼代3次后，選擇生長良好，大小均一且結構疏松的鐵皮石斛原球莖接種到MS+2.0mg·L^-16-BA+0.5mg·L^-1NAA+0～0.25mg·L^-1Na₂SeO₃+30g·L^-1蔗糖，pH值為5.8的液體培養基中，接種量為1～5g每瓶，于恒溫振蕩器中進行培養生長，共培養51d；在培養第6d開始，每隔3d隨機收獲5瓶，重復3次；將收獲的樣品進行處理之后，按照測定方法，測定其鮮重、干重以及增殖系數，并繪制原球莖的生長曲線。

6.根據權利要求5所述的一種富硒鐵皮石斛原球莖懸浮培養方法，其特征在于，所述液體培養基為MS+2.0mg·L^-16-BA+0.5mg·L^-1NAA+0.05mg·L^-1Na₂SeO₃+30g·L^-1蔗糖，pH值為5.8。

7.根據權利要求5所述的一種富硒鐵皮石斛原球莖懸浮培養方法，其特征在于，所述接種量為3g每瓶，即100g·L^-1。

8.根據權利要求5所述的一種富硒鐵皮石斛原球莖懸浮培養方法，其特征在于，培養周期為30d。

9.根據權利要求5所述的一種富硒鐵皮石斛原球莖懸浮培養方法，其特征在于，懸浮培養條件為：培養溫度25±2℃，光照周期為12h/d，光照強度2000lx，轉速110r/min。