[發明專利]一種發酵罐生產兩性霉素B的分批補料發酵方法

在審

• 申請號: 202111085830.5
• 申請日: 2021-09-16
• 公開（公告）號: CN113832205A
• 公開（公告）日: 2021-12-24
• 發明（設計）人: 柳志強;張博;郭一平;楊曉章;黨萬利;吳哲明;黃良剛;周俊平;鄭裕國
• 申請（專利權）人: 浙江工業大學;浙江天臺藥業股份有限公司
• 主分類號: C12P19/62
• 分類號: C12P19/62;C12Q3/00;C12N1/20;C12R1/465
• 代理公司: 浙江千克知識產權代理有限公司 33246
• 代理人: 冷紅梅

1.一種發酵罐生產兩性霉素B的分批補料發酵方法，所述方法為：將結節鏈霉菌接種至種子培養基，獲得種子液；種子液接種至發酵培養基，進行發酵培養，發酵總時間120±36小時，發酵過程中參數控制如下：

(1)控制發酵體系pH維持在6.5～7.8，直至發酵結束；

(2)在發酵培養第0～36h，維持溫度在31±2℃，當發酵至36h時，將溫度降至26±2℃，維持該溫度直至發酵結束；

(3)發酵前期使菌體在自然DO條件下生長，當發酵體系DO值下降至20％～30％時，控制DO值維持在大于20％直至發酵結束；

(4)控制發酵培養基中葡萄糖濃度，發酵過程中葡萄糖濃度下降到1％～2％時，進行恒速補料，控制葡萄糖含量為0.5％～1％至發酵結束。

2.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述結節鏈霉菌為結節鏈霉菌CCTCC NO.M2017426。

3.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述發酵罐容量為500L～10000L。

4.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述種子培養基組成如下：蛋白胨10～30g/L，酵母提取物5～20g/L，氯化鈉1～10g/L，葡萄糖5～20g/L，碳酸鈣0.5～2g/L，溶劑為水，pH7.0～7.2。

5.如權利要求1所述的方法，其特征在于所述發酵培養基組成如下：葡萄糖80～100g/L，黃豆粉30～50g/L，檸檬酸鈉5～10g/L，硫酸鎂0.5～5g/L，硫酸錳0.05～1g/L，氯化鈣0.05～1g/L，碳酸鈣5～10g/L，PPG2000 0.5～5g/L，溶劑為水，pH自然。

6.如權利要求1所述的方法，其特征在于發酵過程中以質量濃度30±2％的氨水控制pH值。