[發明專利]一種重組解脂耶氏酵母菌、其構建方法以及應用有效
| 申請號： | 202111083923.4 | 申請日： | 2021-09-15 |
| 公開（公告）號： | CN113832044B | 公開（公告）日： | 2022-09-02 |
| 發明（設計）人： | 施天穹;黃和;彭倩倩;沈琦;楊彩玲 | 申請（專利權）人： | 南京師范大學 |
| 主分類號： | C12N1/19 | 分類號： | C12N1/19;C12N15/60;C12N15/81;C12P7/02;C12R1/645 |
| 代理公司： | 石家莊科誠專利事務所(普通合伙) 13113 | 代理人： | 張紅衛;蘇興娟 |
| 地址： | 210023 *** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 重組 解脂耶氏 酵母菌 構建 方法 以及 應用 | ||
1.一種重組解脂耶氏酵母菌，其特征在于，所述重組解脂耶氏酵母菌，是在解脂耶氏酵母菌基因組中插入廣藿香醇合酶編碼基因PS表達盒，并將解脂耶氏酵母菌中的內源性ERG9啟動子pERG9替換為銅離子抑制啟動子pCTR1；
所述廣藿香醇合酶編碼基因PS是密碼子優化的，且所述密碼子優化的廣藿香醇合酶編碼基因PS序列如SEQ ID NO.1所示；
所述密碼子優化的廣藿香醇合酶編碼基因PS的表達盒，啟動子為解脂耶氏酵母菌的銅離子激活啟動子pMT-2，終止子為解脂耶氏酵母菌的TXPR2T終止子；
所述解脂耶氏酵母菌的銅離子激活啟動子pMT-2序列如SEQ ID NO.2所示；
所述解脂耶氏酵母菌的TXPR2T終止子序列如SEQ ID NO.3所示；
所述銅離子抑制啟動子pCTR1序列如SEQ ID NO.4所示。
2.根據權利要求1所述的重組解脂耶氏酵母菌，其特征在于，所述廣藿香醇合酶編碼基因PS的表達盒通過質粒形式導入、整合至解脂耶氏酵母菌基因組上。
3.根據權利要求1或2所述的重組解脂耶氏酵母菌，其特征在于，所述解脂耶氏酵母菌為
4.權利要求 1-3中任一項所述的重組解脂耶氏酵母菌的應用，其特征在于，所述重組解脂耶氏酵母菌通過發酵生產廣藿香醇。
5.根據權利要求4所述的重組解脂耶氏酵母菌的應用，其特征在于，所述重組解脂耶氏酵母菌發酵時，銅離子的濃度為70-100μmol/L。
6.根據權利要求4或5所述的重組解脂耶氏酵母菌的應用，其特征在于，所述發酵，為搖床培養，溫度為28-30℃，時間為10-15h，轉速為180-200rpm，發酵培養基中葡萄糖濃度為50-60g/L。
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