[發(fā)明專利]一種快速檢測食品中腈菌唑殘留的方法及其使用的磁性表面分子印跡吸附劑

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• 申請?zhí)枺?/td>: 202111082690.6
• 申請日: 2021-09-15
• 公開（公告）號: CN113791061A
• 公開（公告）日: 2021-12-14
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 宋偉;韓芳;劉宇欣;趙志慧;王鈺;鄧曉軍;伊雄海;古淑青;郭春麗;呂亞寧;周典兵;丁磊;鄭平
• 申請（專利權(quán)）人: 合肥海關(guān)技術(shù)中心;上海如海光電科技有限公司;上海海關(guān)動植物與食品檢驗檢疫技術(shù)中心
• 主分類號: G01N21/65
• 分類號: G01N21/65;C08F292/00;C08F220/04;C08F222/14;C08J9/26
• 代理公司: 蘇州翔遠專利代理事務(wù)所(普通合伙) 32251
• 代理人: 王華

1.一種磁性表面分子印跡吸附劑，其特征在于：制備方法包括下列步驟：

步驟1：向一三口燒瓶中加入FeSO₄?7H₂O，然后加入乙醇溶液，接著加入原硅酸乙酯和PEG10000，通入氮氣驅(qū)除氧氣，攪拌混合均勻，然后在攪拌條件下加入KBH₄水溶液，反應(yīng)60-90 min，生成Fe@SiO₂納米顆粒，用磁選法分離出納米鐵粒子，先用脫氧去離子水洗滌3-5次，再用乙醇洗滌3-5次后在真空環(huán)境下干燥，得到Fe@SiO₂納米粒子；

步驟2：將步驟1合成的Fe@SiO₂納米粒子分散于甲苯中，通氮氣，室溫攪拌30-40min，然后加入三乙胺和3-氯丙基三甲氧基硅烷，升溫到105-115°C繼續(xù)反應(yīng)20-25h，冷卻至室溫后磁分離目標(biāo)產(chǎn)物，分別用水和乙醇清洗，60-70°C條件下真空下干燥，得到Fe@SiO₂@Cl納米微球；

步驟3：在一反應(yīng)容器中加入步驟2制得的Fe@SiO₂@Cl納米微球、CuCl、2,2’-二聯(lián)吡啶、腈苯唑、TFMAA、EGDMA和乙腈，氮氣氣氛中混勻，在70-100℃條件下攪拌反應(yīng)20-25 h；反應(yīng)完成后磁分離目標(biāo)產(chǎn)物，分別用乙腈和甲醇洗滌；然后以甲醇-乙酸為提取劑，索氏提取20-25 h，用甲醇洗至pH值為7，在 20-60 ℃條件下下真空干燥過夜，得到磁性表面分子印跡吸附劑。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的磁性表面分子印跡吸附劑，其特征在于：所述乙醇溶液中的乙醇與水的體積比為4：5；甲醇-乙酸中甲醇與乙酸的體積比為9：1。

3.一種快速檢測食品中腈菌唑殘留的方法，其特征在于：包括下列步驟：

步驟1：將待檢測樣品破碎；

步驟2：將1-2g破碎后的樣品加入一離心管中，然后加入10~20mL的乙腈-水，渦旋振蕩提取，離心后取上清液；

步驟3：取5~10mL上清液，加入50~100mg權(quán)利要求1或2所述的磁性表面分子印跡吸附劑，振蕩萃取20~30 min；用磁鐵將磁性表面分子印跡吸附劑聚集到底部，傾倒出溶液，再用乙腈-水洗滌磁性表面分子印跡吸附劑；

步驟4：將步驟3獲得的磁性表面分子印跡吸附劑轉(zhuǎn)移至一離心管，加入0.8-1.2mL乙腈溶液渦旋1~2 min進行解吸，收集解析液，解吸操作重復(fù)2~3次后合并所有解吸液并用氮氣吹干，再加入0.2-0.5 mL復(fù)溶液進行復(fù)溶，即為待測液；

步驟5：取20μL待測液，加入輔助增強試劑，然后再加200μL金納米粒子溶膠，混勻后用拉曼光譜儀進行檢測，如存在腈菌唑拉曼光譜特征峰，則判定樣品中含有腈菌唑殘留。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的快速檢測食品中腈菌唑殘留的方法，其特征在于：所述復(fù)溶液為體積分數(shù)為20%的甲醇水溶液。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的快速檢測食品中腈菌唑殘留的方法，其特征在于：所述輔助增強試劑為0.01-1mol/L鹽酸溶液。

6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的快速檢測食品中腈菌唑殘留的方法，其特征在于：待測液、金納米粒子溶膠與輔助增強試劑之間的體積比1:5-10:1-2。

7.根據(jù)權(quán)利要求3所述的快速檢測食品中腈菌唑殘留的方法，其特征在于：用拉曼光譜儀進行檢測時：采用的激光光源波長為785±1 nm，線寬小于0.1 nm，能量大于或等于250mW；光譜分辨率≤15 cm^-1，掃描范圍400-3200cm^-1。

8.根據(jù)權(quán)利要求3所述的快速檢測食品中腈菌唑殘留的方法，其特征在于：拉曼譜圖中出現(xiàn)腈菌唑的特征峰為632±5 cm^-1、739±5 cm^-1、1093±5 cm^-1。

9.根據(jù)權(quán)利要求3所述的快速檢測食品中腈菌唑殘留的方法，其特征在于：稱取腈菌唑標(biāo)準(zhǔn)品，用甲醇配制成濃度為500μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備液，以空白基質(zhì)溶液分別置濃度為1 mg/kg-20mg/kg基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液，取20μL基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液于檢測池中，加入30μL輔助增強試劑，再加入200μL金納米粒子溶膠，混勻后用拉曼光譜儀進行檢測，獲得不同濃度基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)溶液的表面增強拉曼光譜圖，在1093±5cm^-1特征峰下，峰強度與腈菌唑濃度線性相關(guān)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線，采用標(biāo)準(zhǔn)曲線法定量檢測待測樣品中腈菌唑的濃度。