[發明專利]工程免疫細胞及其用途和生產方法

在審

• 申請號: 202111064400.5
• 申請日: 2016-02-05
• 公開（公告）號: CN113713091A
• 公開（公告）日: 2021-11-30
• 發明（設計）人: 達里奧·康潘;貴廣·神谷明
• 申請（專利權）人: 新加坡國立大學
• 主分類號: A61K39/00
• 分類號: A61K39/00;A61P35/00;A61P35/02;A61P37/02;C12N5/10;C12N15/62;C12N15/13
• 代理公司: 北京銀龍知識產權代理有限公司 11243
• 代理人: 鐘海勝;宋琴芝

1.工程免疫細胞在制備用于治療癌癥的藥物中的用途，包括施用治療有效量的工程免疫細胞，所述工程免疫細胞包含第一核酸和第二核酸，所述第一核酸包含編碼嵌合抗原受體(CAR)的核苷酸序列，所述第二核酸包含編碼與定位結構域連接的抗體的核苷酸序列，

其中，所述抗體結合于：

CD3/T細胞受體(TCR)復合物中的因子，所述因子選自由CD3ε、TCRα、TCRβ、TCRγ、TCRδ、CD3δ、CD3γ和CD3ζ組成的組；或

下調免疫應答的受體，所述受體選自由程序性細胞死亡蛋白1(PD-1)、細胞毒性T淋巴細胞相關蛋白4(CTLA-4)、含T細胞免疫球蛋白和粘蛋白結構域-3(Tim3)、殺傷細胞免疫球蛋白樣受體(KIR)2DL1、KIR2DL2/DL3和NKG2A組成的組；并且

其中，所述與定位結構域連接的抗體下調所述因子或所述受體的細胞表面表達。

2.根據權利要求1所述的用途，其中，所述工程免疫細胞是工程T細胞、工程天然殺傷(NK)細胞、工程NK/T細胞、工程單核細胞、工程巨噬細胞或工程樹突狀細胞。

3.根據權利要求1所述的用途，其中，所述CAR是抗CD19-4-1BB-CD3ζCAR。

4.根據權利要求1所述的用途，其中，所述抗體是單鏈可變片段(scFv)。

5.根據權利要求1或4所述的用途，其中，結合CD3ε的所述抗體或所述scFv包括：含有SEQ ID NO:12的重鏈可變區(VH)和含有SEQ ID NO:13的輕鏈可變區(VL)。

6.根據權利要求1或4所述的用途，其中，結合NKG2A的所述抗體或所述scFv包括：含有SEQ ID NO:32的重鏈可變區(VH)和含有SEQ ID NO:33的輕鏈可變區(VL)。

7.根據權利要求1或4所述的用途，其中，結合KIR2DL1和KIR2DL2/DL3的所述抗體或所述scFv包括：含有SEQ ID NO:36的重鏈可變區(VH)和含有SEQ ID NO:37的輕鏈可變區(VL)。

8.根據權利要求1所述的用途，其中，所述定位結構域包含內質網(ER)或高爾基體保留序列；蛋白酶體定位序列；源自CD8α、CD8β、4-1BB、CD28、CD34、CD4、FcεRIγ、CD16、OX40、CD3ζ、CD3ε、CD3γ、CD3δ、TCRα、CD32、CD64、VEGFR2、FAS或FGFR2B的跨膜結構域序列。

9.根據權利要求8所述的用途，其中，所述ER或高爾基體保留序列包含氨基酸序列KDEL(SEQ ID NO:4)、KKXX(SEQ ID NO:9)、KXD/E(SEQ ID NO:10)、或YQRL(SEQ ID NO:11)，其中X是任何氨基酸，或者所述蛋白酶體定位序列包含PEST基序。

10.根據權利要求1所述的用途，其中，所述細胞適于通過靜脈內輸注、動脈內輸注、直接注射到腫瘤內和/或手術后的腫瘤床灌注、在腫瘤部位處在人工支架中植入、鞘內施用或眼內施用而施用到所述受試者體內。

11.根據權利要求1所述的用途，其中，所述癌癥是實體瘤或血液惡性腫瘤。

12.根據權利要求1所述的用途，其中，所述癌癥是CD3+癌癥、CD19+癌癥、或B細胞惡性腫瘤。

13.根據權利要求12所述的用途，其中，所述B細胞惡性腫瘤選自由以下組成的組：復發性或難治性急性成淋巴細胞性白血病(ALL)、慢性淋巴細胞性白血病(CLL)、B細胞非霍奇金淋巴瘤(B-NHL)和大B細胞淋巴瘤。

14.根據權利要求1所述的用途，其中，所述工程免疫細胞是同種異體T細胞。