[發明專利]一種儀器檢測肝素類樣品效價的新方法

在審

• 申請號: 202111053577.5
• 申請日: 2021-08-31
• 公開（公告）號: CN113804874A
• 公開（公告）日: 2021-12-17
• 發明（設計）人: 王東玲;韓飛;吳曉明;李穎穎
• 申請（專利權）人: 煙臺東誠藥業集團股份有限公司
• 主分類號: G01N33/543
• 分類號: G01N33/543;G01N35/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明公布了一種檢測肝素類樣品效價的方法，涉及一種自動化液體處理工作站，可利用其強大的編程功能實現實驗流程的自動化，模擬人工檢測流程，包括：稀釋樣品梯度、移取樣品加入酶標板、加入反應試劑保溫振蕩、抓取酶標板至酶標儀讀數及自動收集廢棄酶標板等操作。本發明涉及的檢測方法可根據實驗需求自由整合臺面，直觀的編輯器可完成各類程序的編寫，自帶保溫振蕩功能，可與讀板程序連接實現酶標板的自由運輸及整合，且檢測不受時間限制，可實現無人監視的排板檢測；涉及的方法可節省人力及試劑且檢測準確、重現性好、效率高，可彌補人工檢測方法誤差大、不穩定的缺陷。

技術領域

本發明涉及一種肝素類樣品效價檢測的方法，屬于多組分生化原料藥分析技術領域。

背景技術

本發明所述肝素類樣品包括肝素鈉/鈣及低分子肝素鈉/鈣。EP7.0采用凝固法測定肝素效價，該方法繁瑣且準確度差；EP8.0改為生色底物法測定，簡化了操作程序且提高了準確度，但該方法成本高，且對人員技術要求較高，目前EP、 USP收載的肝素類樣品效價檢測均采用該生色底物法，ChP2020版將生色底物法進行優化，擴大了試劑體積選用范圍，將生色底物法由半微量反應變為微量反應，節約了試劑成本，進一步簡化了操作程序，但該方法仍然存在影響因素多，實驗誤差大，對人員要求高等不足，且由于反應過程復雜，人員操作把控不當時易導致結果不穩定，既耗時間又耗試劑。

本發明針對上述方法不足引進一種全自動液體處理工作站，該全自動檢測方法成功替代了人員操作，將生色底物法改為儀器主導的生色底物法，該方法可輕松實現溶液自動稀釋、自動加樣、自動加試劑，并利用機械手輕松實現操作臺面上的樣品板運輸；可代替人工大部分操作，基本實現效價檢測自動化，規避了人員操作誤差，檢測效率高，試劑消耗少，不受限于檢測時間限制，可實現類似液相色譜的排序檢測，該方法成功將生色底物法運用到了自動化設備，將操作主體由人員轉為儀器，并可利用高級編程功能實現方法的多樣整合優化。

發明內容

本發明的目的在于改進現有檢測手段的不足，從而提供一種較為先進的全自動液體處理工作站檢測肝素類樣品效價的新方法。該全自動檢測方法通過強大的程序編輯功能，可根據實驗需求自由編輯組合，可連接各種輔助設備，如可制冷制熱的控溫設備及讀數酶標板的讀數，可實現檢測方法的自由整合優化、實現無人監視的樣品排板檢測；引進的新型效價檢測方法分析準確，重現性好，節約人力物力，大大提高檢測效率。

該發明相對于傳統的檢測，檢測效率高，儀器檢測一天的檢測任務相當于6個熟練操作人員一天的檢測任務；準確度高，排除人為原因，儀器檢測的準確度幾乎為100％而傳統檢測的準確度在80％左右；操作簡單，相較于傳統檢測方法，操作人員只需將樣品稀釋至0.1IU/ml，整個配制過程僅需要一到兩個小時，而傳統的檢測操作人員要獨立完成稀釋、梯度配制、轉移及檢測工作，整個配制檢測過程需要耗費操作人員1天的工作量。本發明的目的可以通過下述技術方案實現：1)利用直觀的編輯器完成各類程序的編寫，可實現樣品的自由配制、樣品排板布局的自由編制2)根據設定程序配制樣品溶液，可同時稀釋多批樣品溶液至規定濃度并自動吹打混勻，3)根據程序加樣，機械手抓取酶標板至反應區并移取樣品至反應區酶標板，且根據需要一次可多板疊加檢測多批樣品，4)根據程序加試劑反應，配帶保溫及振蕩功能，可邊加試劑邊保溫及振蕩，5)根據程序讀取酶標板，機械手自動抓取酶標板至酶標儀讀板，6)根據程序收集廢棄酶標板，機械手抓取讀板后的酶標板至廢棄板收集區，7)程序循環執行，繼續上述步驟。

本發明的測定方法如下步驟所示：

1.人員前處理

1.1根據估計效價人工配制標準品溶液及供試品溶液至0.1IU/ml

1.2將配制好的0.1IU/ml溶液轉移至儀器的樣品架

1.3調用程序打開相應的軟件，輸入樣品數量，依次確認儀器自動計算的試劑及耗材用量，確認無誤后點擊運行。