[發明專利]一種用于檢測FLT3基因突變的引物、探針及試劑盒

有效

• 申請號: 202111041056.8
• 申請日: 2021-09-07
• 公開（公告）號: CN113502332B
• 公開（公告）日: 2021-12-17
• 發明（設計）人: 羅景燕;李靜芳;許少飛;賴炳權
• 申請（專利權）人: 廣東永諾醫療科技有限公司;廣州永諾生物科技有限公司
• 主分類號: C12Q1/6886
• 分類號: C12Q1/6886;C12Q1/6851;C12N15/11
• 代理公司: 廣州三環專利商標代理有限公司 44202
• 代理人: 顏希文;郝傳鑫

1.一種FLT3基因突變的Drop-off數字PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括引物對、特異性探針和內參探針；所述引物對的序列如SEQ ID NO:1和SEQ ID NO:2所示；所述特異性探針的序列如SEQ ID NO:3所示；所述內參探針的序列如SEQ ID NO:4所示；所述特異性探針的5’端標記FAM，3’端標記BHQ1；所述內參探針的5’端標記VIC，3’端標記BHQ1。

2.根據權利要求1所述的FLT3基因突變的Drop-off數字PCR檢測試劑盒，其特征在于，包括FLT3-TKD檢測混合液、對照品和PCR反應預混液；所述FLT3-TKD檢測混合液包括權利要求1所述的引物和探針；所述PCR反應預混液包括緩沖液、dNTPs、taq酶和UDG酶。

3.根據權利要求2所述的FLT3基因突變的Drop-off數字PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述引物在FLT3-TKD檢測混合液中的濃度為900nM，所述探針在FLT3-TKD檢測混合液中的濃度為250nM。

4.根據權利要求2所述的FLT3基因突變的Drop-off數字PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述對照品包括FLT3 D835弱陽性對照品、FLT3 I836del弱陽性對照品和空白對照品；所述FLT3 D835弱陽性對照品為FLT3 D835突變重組質粒和FLT3野生型質粒混合而成；所述FLT3I836del弱陽性對照品為FLT3 I836突變重組質粒和FLT3野生型質粒混合而成；所述空白對照品為無核酶水；所述FLT3 D835弱陽性對照品為突變型FLT3 D835質粒溶液用FLT3野生型質粒溶液稀釋10倍配制而成；所述FLT3 I836del弱陽性對照品為突變型FLT3 I836del質粒溶液用FLT3野生型質粒溶液稀釋10倍配制而成。

5.根據權利要求4所述的FLT3基因突變的Drop-off數字PCR檢測試劑盒，其特征在于，所述FLT3野生型質粒的核苷酸序列為SEQ ID NO:5；所述FLT3 D835突變重組質粒的核苷酸序列為SEQ ID NO:6；所述FLT3 I836突變重組質粒的核苷酸序列為SEQ ID NO:7。