[發明專利]一種高活性植物乳桿菌菌劑及其制備方法

在審

• 申請號: 202111037144.0
• 申請日: 2021-09-06
• 公開（公告）號: CN113717891A
• 公開（公告）日: 2021-11-30
• 發明（設計）人: 林奇軍
• 申請（專利權）人: 福州氕氘氚生物科技有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12P21/06;C12R1/25
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供一種高活性植物乳桿菌菌劑及其制備方法：菌種的富集：用接種環劃取一環斜面保藏的植物乳桿菌，接種至50mL MRS液體培養基中，在37℃的培養箱中過夜培養。然后，按接種量的1％吸取種子培養液加入新鮮的MRS液體培養基中，在37℃的培養箱中培養24h。培養結束后，用高速冷凍離心機在4℃，8000g條件下離心10min，收集菌體，并用無菌生理鹽水洗滌兩次，得到植物乳桿菌菌泥，大豆分離蛋白質肽的制備：在100mL磷酸緩沖液(50mM，pH 7.5)中添加10g大豆分離蛋白，再添加堿性蛋白酶500?1000U/g，在50℃下水解4?6h，本申請解決了發酵菌劑中乳酸菌存活率低，穩定性差等問題，并將乳酸菌的存活率提高到94.7％以上，提供了一種高活性植物乳桿菌菌劑及其制備方法。

技術領域

本發明涉及技術領域，具體為一種高活性植物乳桿菌菌劑及其制備方法，屬于食品加工領域。

背景技術

植物乳桿菌是乳酸菌的一種，最適生長溫度為30～38攝氏度厭氧或兼性厭氧菌種為直或彎的桿狀，單個、有時成對或成鏈狀，屬于同型發酵乳酸菌；植物乳桿菌作為我國衛生部公布的可用于食品的益生菌菌種之一，能夠有效耐受人體的消化系統，在腸道內大量存活，發揮調節腸道菌群平衡、促進人體消化吸收等作用；同時，植物乳桿菌還具有降膽固醇、預防心血管疾病、控制體重等益生保健功能；因此新型益生菌正日益受到國內外的重視，逐步成為海內外研究開發的熱點；

但是目前現有技術存在培育的菌劑菌種存活率不高，儲藏穩定性差等問題；市面迫切需要一種新的微生物發酵菌劑的制備方法。

本發明內容

本發明的目的在于提供了一種高活性植物乳桿菌菌劑及其制備方法。該方法制備的菌劑菌種具有存活率高，儲藏穩定性強等優點，這為我國微生物發酵菌劑的制備提供了新的思路，為開發高品質的產品提供了保障。

本發明的目的是解決發酵菌劑中乳酸菌存活率低，穩定性差等問題，提供了一種高活性植物乳桿菌菌劑及其制備方法。

本發明提供的一種高活性植物乳桿菌菌劑及其制備方法，其特征在于：

菌種的富集：用接種環劃取一環斜面保藏的植物乳桿菌，接種至50mL MRS液體培養基中，在37℃的培養箱中過夜培養。然后，按接種量的1％吸取種子培養液加入新鮮的MRS液體培養基中，在37℃的培養箱中培養24h。培養結束后，用高速冷凍離心機在4℃，8000g條件下離心10min，收集菌體，并用無菌生理鹽水洗滌兩次，得到植物乳桿菌菌泥。

大豆分離蛋白質肽的制備：在100mL磷酸緩沖液(50mM，pH 7.5)中添加10g大豆分離蛋白，再添加堿性蛋白酶500-1000U/g，在50℃下水解4-6h。酶解結束后，升溫至90℃滅酶20min。滅酶后，通過冷凍干燥法回收酶解后的大豆蛋白水解物。

冷凍干燥制備菌劑：按質量分數配置3％大豆蛋白水解物，5％海藻糖，5％抗性糊精的保護劑。100mL培養液富集的菌泥添加10-20mL保護劑，混合均勻。然后，置于5℃預冷15-30min。然后，將預冷后的菌懸液置于-80℃預凍2-6h，把冷凍后的菌置于冷凍干燥機(真空度50Pa)中凍干24-36h。凍干結束后，研磨成粉末并真空包裝，保藏于4℃。

有益效果：

本申請解決了發酵菌劑中乳酸菌存活率低，穩定性差等問題，并將乳酸菌的存活率提高到94.7％以上，提供了一種高活性植物乳桿菌菌劑及其制備方法。

附圖說明：

圖1：堿性蛋白酶量對菌劑制備的影響變化示意圖；

圖2：酶解時間對菌劑制備的影響變化示意圖；

圖3：保護劑添加量對菌劑制備的影響變化示意圖；

圖4：預冷時間對菌劑制備的影響變化示意圖；

圖5；預凍時間對菌劑制備的影響變化示意圖；