[發明專利]篩選轉基因植物的組合物和方法

在審

• 申請號: 202111029399.2
• 申請日: 2021-09-02
• 公開（公告）號: CN113621644A
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 王益行;呂曉榮;宋淼泉;凌建群
• 申請（專利權）人: 杭州先端生物科技有限公司;江蘇吉銳生物技術有限公司
• 主分類號: C12N15/84
• 分類號: C12N15/84;C12N15/53;C12N15/54;C12N5/10;A01H4/00;A01H5/00;A01H6/46;C12Q1/02
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1.篩選轉基因植物的載體，所述載體包含DFR、LDOX、UFGT基因，所述DFR的基因序列如SEQ ID NO.1所示，所述LDOX的基因序列如SEQ ID NO.2所示，所述UFGT的的基因序列如SEQID NO.3所示。

2.如權利要求1所述的載體，還包括其他標記基因。

3.如權利要求2所述的載體，所述標記基因選自以下基因中的1種、2種，或3種：潮霉素除草劑抗性基因、卡那霉素抗生素抗性基因，氨芐青霉素抗生素抗性基因。

4.如權利要求1-3所述任一載體，所述植物為雙子葉植物或單子葉植物。

5.如權利要求4所述的載體，所述植物為水稻。

6.包含權利要求1-3，5所述任一載體的宿主細胞。

7.包含權利要求4所述任一載體的宿主細胞。

8.如權利要求6所述的宿主細胞，其特征在于：所述的DFR、LDOX、UFGT基因可以分別位于2個或3個載體中，也可以位于同一個載體中。

9.如權利要求7所述的宿主細胞，其特征在于：所述的DFR、LDOX、UFGT基因可以分別位于2個或3個載體中，也可以在同一個載體中。

10.如權利要求6所述的宿主細胞，其特征在于：所述植物為雙子葉植物或單子葉植物。

11.如權利要求7-9所述的任一宿主細胞，其特征在于：所述植物為雙子葉植物或單子葉植物。

12.如權利要求10所述的宿主細胞，其特征在于：所述植物為水稻。

13.如權利要求11所述的宿主細胞，其特征在于：所述植物為水稻。

14.篩選轉基因植物的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1）構建含有如權利要求1所述的DFR、LDOX、UFGT基因和外源基因的載體；

2）將步驟1）構建的載體轉入植物愈傷組織中，獲得含有DFR、LDOX、UFGT和外源基因的愈傷組織；

3）添加DFR基因編碼的酶的底物；

4）挑選顯色的愈傷組織。

15.如權利要求14所述的方法，其特征在于：還增加如下步驟，將挑選出的愈傷組織，于去除所述酶底物的培養基中培養1-5天；挑選顏色褪去的愈傷組織顆粒。

16.如權利要求15所述的方法，其特征在于：還增加如下步驟，對顏色褪去的愈傷組織顆粒，重復權利要求14的步驟3）、4），直到所有愈傷組織顆粒均全部完全顯色。

17.如權利要求14-16所述任一的方法，其特征在于：所述步驟1）還包括其他的標記基因。

18.如權利要求17所述任一的方法，其特征在于：所述標記基選自以下基因中的1種、2種，或3種：潮霉素除草劑抗性基因、卡那霉素抗生素抗性基因，氨芐青霉素抗生素抗性基因。

19.如權利要求14-16,18所述的任一方法，其特征在于：所述酶的底物為二氫楊梅黃酮、二氫槲皮素或二氫堪非醇。

20.如權利要求17所述的方法，其特征在于：所述酶的底物為二氫楊梅黃酮、二氫槲皮素或二氫堪非醇。

21.如權利要求14-16所述的任一方法，其特征在于：經轉基因處理后的植物愈傷組織顏色與未經處理的野生植物愈傷組織顏色，可肉眼清晰分辨。