[發明專利]一種重組高密度脂蛋白-聚酰胺-胺納米復合物、制法及應用

有效

• 申請號: 202111010266.0
• 申請日: 2021-08-31
• 公開（公告）號: CN113616602B
• 公開（公告）日: 2022-05-10
• 發明（設計）人: 王偉;張子瑤;傅聰
• 申請（專利權）人: 中國藥科大學
• 主分類號: A61K9/16
• 分類號: A61K9/16;A61K47/59;A61K47/60;A61K47/62;A61K47/69;A61K31/704;A61K31/4745;A61P35/00;A61P15/14;B82Y5/00;B82Y40/00
• 代理公司: 南京蘇高專利商標事務所(普通合伙) 32204
• 代理人: 柏尚春

1.一種重組高密度脂蛋白-聚酰胺-胺納米復合物，其特征在于，所述納米復合物主要由硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇（DPSE-PEG）、聚酰胺-胺型樹枝狀高分子（PAMAM）、阿霉素、磷脂、膽固醇、膽固醇酯、載脂蛋白、靶向肽、硬脂酸和咪喹莫特組成，所述納米復合物為核殼結構，其核層為由磷脂、膽固醇、膽固醇酯、載脂蛋白和咪喹莫特組成的負載咪喹莫特的靶向重組高密度脂蛋白納米粒，磷脂層殼層為由阿霉素和DSPE-PEG-PAMAM制得的負載阿霉素的聚酰胺-胺型樹狀納米粒（DPP/DOX），所述靶向肽通過硬脂酸插入磷脂層的表面，所述靶向肽為C18-M2pep，序列為C18-YEQDPWGVKWWY，所述DSPE-PEG-PAMAM是硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇（DPSE-PEG）修飾的聚酰胺-胺型樹枝狀高分子（PAMAM），所述硬脂酰基磷脂酰乙醇胺-聚乙二醇為DPSE-PEG2000-CHO，所述聚酰胺-胺型樹枝狀高分子為PAMAM-NH₂，所述DPSE-PEG2000-CHO和PAMAM-NH₂的單體摩爾比為1:1.2~1:2。

2.根據權利要求1所述的納米復合物，其特征在于，所述DSPE-PEG2000-CHO的末端為醛基封端；所述PAMAM為G4-PAMAM，其末端為氨基封端。

3.根據權利要求1所述的納米復合物，其特征在于，所述重組高密度脂蛋白-聚酰胺-胺納米復合物的磷脂層殼層是將DSPE-PEG-PAMAM通過疏水作用結合阿霉素，形成聚酰胺-胺型樹狀納米粒（DPP/DOX），所述核層與磷脂層殼層通過疏水作用結合。

4.根據權利要求1所述的納米復合物，其特征在于，所述磷脂為大豆卵磷脂、蛋黃卵磷脂、二肉豆蔻酰卵磷脂、二棕櫚酰卵磷脂或二硬脂酰卵磷脂；所述膽固醇酯為膽固醇與脂肪酸縮合成的膽固醇脂肪酸酯；所述載脂蛋白為ApoA-Ⅰ。

5.權利要求1所述的重組高密度脂蛋白-聚酰胺-胺納米復合物的制法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）制備負載阿霉素的聚酰胺-胺型樹狀納米粒：將DPSE-PEG2000-CHO和PAMAM-NH₂添加到DMSO 溶液中；調節溶液為堿性，冷凍干燥得到DSPE-PEG-PAMAM（DPP）；滴加阿霉素的甲醇溶液，攪拌離心，過濾，即得負載阿霉素的聚酰胺-胺型樹狀納米粒（DPP/DOX）；

（2）制備負載咪喹莫特的靶向重組高密度脂蛋白納米粒rHDL/R837：將磷脂、膽固醇、膽固醇酯、咪喹莫特溶解在有機溶劑中，旋蒸，加水攪拌，超聲分散，加入載脂蛋白ApoA-Ⅰ孵育，過濾，即得負載咪喹莫特的靶向重組高密度脂蛋白納米粒；

（3）制備重組高密度脂蛋白-聚酰胺-胺納米復合物：將負載咪喹莫特的靶向重組高密度脂蛋白納米粒和負載阿霉素的聚酰胺-胺型樹狀納米粒溶解在水中，調節溶液pH為堿性，攪拌孵育并加入靶向肽，即得所述重組高密度脂蛋白-聚酰胺-胺納米復合物。

6.根據權利要求5所述的制法，其特征在于，步驟（1）中，DPSE-PEG2000-CHO和PAMAM-NH₂的質量比為10:3~10:4。

7.根據權利要求5所述的制法，其特征在于，步驟（1）中，所述阿霉素與DPP質量比為1:10~8:10。

8.根據權利要求5所述的制法，其特征在于，步驟（3）中，負載咪喹莫特的靶向重組高密度脂蛋白納米粒、負載阿霉素的聚酰胺-胺型樹狀納米粒和靶向肽的質量比為50:15:1~50:34:3。

9.權利要求1所述的重組高密度脂蛋白-聚酰胺-胺納米復合物的應用，其特征在于，所述納米復合物在制備改善腫瘤免疫抑制環境和抑制腫瘤生長的藥物的應用。