[發(fā)明專利]一種結(jié)合抗新冠病毒效應(yīng)的金銀花和山銀花鑒別模型及其構(gòu)建方法和應(yīng)用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110992781.7
• 申請日: 2021-08-27
• 公開（公告）號: CN113740474A
• 公開（公告）日: 2021-12-03
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王鐵杰;谷麗菲;王冰;殷果;王玨;喻謝安;王麗君;金一寶;謝雪晴
• 申請（專利權(quán)）人: 深圳市藥品檢驗(yàn)研究院(深圳市醫(yī)療器械檢測中心)
• 主分類號: G01N30/86
• 分類號: G01N30/86
• 代理公司: 北京品源專利代理有限公司 11332
• 代理人: 潘登

本發(fā)明提供了一種結(jié)合抗新冠病毒效應(yīng)的金銀花和山銀花鑒別模型及其構(gòu)建方法和應(yīng)用，所述構(gòu)建方法包括以下步驟：(1)建立金銀花、山銀花液相色譜指紋圖譜；(2)對金銀花、山銀花抑制新冠病毒M^pro的活性進(jìn)行測定，根據(jù)測定結(jié)果及步驟(1)中的指紋圖譜進(jìn)行相關(guān)分析，篩選出具有抗新冠病毒效應(yīng)的活性成分；(3)利用步驟(1)中的指紋圖譜進(jìn)行特征提取，篩選出能表征整體化學(xué)信息的特征性成分，整合步驟(2)得到的活性成分進(jìn)行偏最小二乘?判別分析，構(gòu)建模式識別模型。本發(fā)明提供的金銀花和山銀花鑒別模型能反映抗新冠病毒效應(yīng)，預(yù)測性好，準(zhǔn)確度高，檢測速度快。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥分析領(lǐng)域，具體涉及一種結(jié)合抗新冠病毒效應(yīng)的金銀花和山銀花鑒別模型及其構(gòu)建方法和應(yīng)用，尤其涉及一種準(zhǔn)確、能夠反映抗新冠病毒效應(yīng)的金銀花和山銀花鑒別模型及其構(gòu)建方法和應(yīng)用。

背景技術(shù)

SARS-CoV-2 在入侵細(xì)胞后，會立即利用細(xì)胞內(nèi)的物質(zhì)，合成兩條超長復(fù)制酶多肽，并編碼主蛋白酶(Main protease，M^pro)，對復(fù)制酶多肽進(jìn)行加工，生成SARS-CoV-2 轉(zhuǎn)錄復(fù)制所需的蛋白。其中，M^pro作為一種關(guān)鍵的輔酶，在介導(dǎo)SARS-CoV-2 復(fù)制和轉(zhuǎn)錄的過程中起著關(guān)鍵作用，是抑制SARS-CoV-2的重要靶標(biāo)。

金銀花為忍冬科(Caprifoliaceae)植物忍冬的干燥花蕾或帶初開的花，是大宗常用中藥材。金銀花的傳統(tǒng)功效為清熱解毒，疏散風(fēng)熱，用于風(fēng)熱感冒，溫病發(fā)熱等。同時，金銀花也是目前用于新冠肺炎的連花清瘟膠囊和金花清感方的重要組成部分。研究發(fā)現(xiàn)，金銀花水提取對于M^pro具有顯著的抑制作用，顯示出抗新冠病毒活性。但是，在金銀花的生產(chǎn)流通過程中，由于資源短缺或價格等因素，摻偽混用、等級混亂、以次充好的現(xiàn)象時有發(fā)生。抽檢中藥材、飲片及中成藥質(zhì)量分析報(bào)告均指出同屬近緣品種金銀花和山銀花存在混用現(xiàn)象，甚至在金銀花中摻入非藥用部位。

CN108445108A公開了一種金銀花和山銀花的鑒別方法：待檢樣品提取液使用液相色譜儀和DAD檢測器進(jìn)行檢測。此方法具有簡便、高效、經(jīng)濟(jì)、環(huán)保等優(yōu)點(diǎn)，無需任何對照物質(zhì)或高毒有機(jī)化學(xué)試劑。該方法不但可以用于中藥材，也可以用于含金銀花制劑中的金銀花真?zhèn)位驌絺螜z驗(yàn)，具有很高的應(yīng)用價值。

CN109030666A公開了一種利用高效液相色譜鑒別金銀花和山銀花的方法，當(dāng)待測物為金銀花或山銀花中的一種或兩種時，通過高效液相色譜檢測待測物干燥品中斷馬錢子酸的重量百分比來鑒別金銀花和山銀花，當(dāng)測待測物干燥品中斷馬錢子酸含量小于1.5％，判定為非金銀花；斷馬錢子酸含量大于1.0％，判定為非山銀花。斷馬錢子酸含量小于等于1.5％，且大于等于1.0％時，判定為金銀花或山銀花的混合物。該發(fā)明通過高效液相色譜檢測金銀花和山銀花干燥品中斷馬錢子酸的重量百分比來鑒別金銀花和山銀花，快捷、準(zhǔn)確，為藥品的生產(chǎn)、流通、使用過程中提供了一種鑒別真假的依據(jù)。

由于金銀花的生產(chǎn)流通過程存在摻偽混用、等級混亂、以次充好等問題。因此，如何提供一種準(zhǔn)確的金銀花和山銀花的鑒別方法，成為重大疫情防控用藥中亟待解決的問題。

發(fā)明內(nèi)容

針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，本發(fā)明的目的在于提供一種結(jié)合抗新冠病毒效應(yīng)的金銀花和山銀花鑒別模型及其構(gòu)建方法和應(yīng)用，尤其提供一種準(zhǔn)確的、能夠反映抗新冠病毒效應(yīng)的金銀花和山銀花鑒別模型及其構(gòu)建方法和應(yīng)用。本發(fā)明提供的金銀花和山銀花鑒別模型能反映抗新冠病毒效應(yīng)，預(yù)測性好，準(zhǔn)確度高，檢測速度快。

為達(dá)到此發(fā)明目的，本發(fā)明采用以下技術(shù)方案：

第一方面，本發(fā)明提供了一種結(jié)合抗新冠病毒效應(yīng)的金銀花和山銀花鑒別模型的構(gòu)建方法，所述構(gòu)建方法包括以下步驟：

(1)建立金銀花(Lonicera japonica Thunb.)、山銀花(Lonicera macranthoidesHand.-Mazz)液相色譜指紋圖譜；