[發明專利]雞蛋凍干粉恩諾沙星和環丙沙星參考物質侯選物及其制備方法

在審

• 申請號: 202110980072.7
• 申請日: 2021-08-25
• 公開（公告）號: CN115728397A
• 公開（公告）日: 2023-03-03
• 發明（設計）人: 夏曦;李曉薇;杜靜靜;王成飛
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/08;G01N30/14;G01N30/34;G01N30/36;G01N30/72;G01N1/28;G01N1/38;G01N1/42
• 代理公司: 北京紀凱知識產權代理有限公司 11245
• 代理人: 劉鑫鑫

1.雞蛋凍干粉恩諾沙星和環丙沙星參考物質侯選物的制備方法，包括如下步驟：

S1、對第一組蛋雞給藥恩諾沙星，收集含有恩諾沙星的雞蛋；對第二組蛋雞給藥環丙沙星，收集含有環丙沙星的雞蛋；

S2、將空白雞蛋、所述含有恩諾沙星的雞蛋和所述含有環丙沙星的雞蛋分別進行真空冷凍干燥，得到空白雞蛋凍干粉、含有恩諾沙星的雞蛋凍干粉和含有環丙環丙沙星的雞蛋凍干粉；

S3、將所述空白雞蛋凍干粉、所述含有恩諾沙星的雞蛋凍干粉和所述含有環丙沙星的雞蛋凍干粉粉碎后混勻，得到雞蛋凍干粉恩諾沙星和環丙沙星參考物質侯選物。

2.根據權利要求1所述的制備方法，其特征在于：

所述給藥恩諾沙星的方式為飼喂含有恩諾沙星的飼料，自由采食；

所述含有恩諾沙星的飼料中恩諾沙星的質量百分含量為0.001％～0.003％；

所述給藥恩諾沙星的時間為4～6天；

所述收集含有恩諾沙星的雞蛋為收集給藥第2天～停藥后第5天的雞蛋；

所述給藥環丙沙星的方式為飼喂含有環丙沙星的飼料，自由采食；

所述含有環丙沙星的飼料中環丙沙星的質量百分含量為0.001％～0.003％；

所述給藥環丙沙星的時間為4～6天；

所述收集含有環丙沙星的雞蛋為收集給藥第2天～停藥后第5天的雞蛋。

3.根據權利要求1或2所述的制備方法，其特征在于：

所述真空冷凍干燥的真空度為3～50Pa，時間為4～6天。

4.根據權利要求1-3中任一項所述的制備方法，其特征在于：

所述粉碎的轉速為1500～4000r/min，時間為10～30s；

所述粉碎后過篩，粒徑為0.8～1.0mm；

所述混勻為混合機混勻，混勻時間為2～6h。

5.根據權利要求1-4中任一項所述的制備方法，其特征在于：

所述雞蛋凍干粉恩諾沙星和環丙沙星參考物質侯選物中恩諾沙星和環丙沙星的濃度均為1μg/kg。

6.權利要求1-5中任一項所述的制備方法制備得到的雞蛋凍干粉恩諾沙星和環丙沙星參考物質侯選物或參考物質或基體標準物質。

7.一種雞蛋凍干粉中恩諾沙星和環丙沙星的分析方法，包括如下步驟：

(1)將待檢測的雞蛋凍干粉和水混勻使所述雞蛋凍干粉還原為雞蛋；在所述還原的雞蛋中添加恩諾沙星內標和環丙沙星內標，混勻；在所述混勻后的混合液中加入提取試劑進行提取，得到提取液；

(2)對所述提取液進行脫脂；

(3)將所述脫脂后的提取液通過固相萃取柱進行凈化，收集洗脫液；

(4)將所述洗脫液濃縮并復溶于溶劑中進行液相色譜-質譜/質譜分析。

8.根據權利要求7所述的分析方法，其特征在于：

所述恩諾沙星以m/z 360.3316.1為定量離子對，m/z 360.3245.1為定性離子對；

所述恩諾沙星內標為恩諾沙星-d5；所述恩諾沙星-d5以m/z 365.3321.1為定量離子對；

所述環丙沙星以m/z 332.2288.1為定量離子對，m/z 332.2245.1為定性離子對；

所述環丙沙星內標為環丙沙星-d8；所述環丙沙星-d8以mz 340.3/296.2為定量離子對。