[發(fā)明專利]一種兩步酶法制備(R)-N-(2,6-二甲基苯基)氨基丙酸甲酯的方法

在審

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• 申請日: 2021-08-24
• 公開（公告）號: CN113667704A
• 公開（公告）日: 2021-11-19
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 章銀軍;夏元丹;魏立天;周鉻鵬;謝添莉;汪釗
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: C12P13/00
• 分類號: C12P13/00;C12N11/082;C12N9/18;C12N1/21;C12R1/19
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司 33201
• 代理人: 黃美娟;李世玉

本發(fā)明公開了一種兩步酶法制備(R)?N?(2,6?二甲基苯基)氨基丙酸甲酯的方法，所述方法以固定化酯酶PAE為催化劑，以(R,S)?N?(2,6?二甲基苯基)氨基丙酸甲酯為底物，以水為溶劑，在30?40℃反應(yīng)制備(R)?2,6?二甲基苯基氨基丙酸；將(R)?2,6?二甲基苯基氨基丙酸與脂肪酶、無水甲醇、水和正己烷混合，在30?60℃反應(yīng)制備(R)?N?(2,6?二甲基苯基)氨基丙酸甲酯。本發(fā)明固定化酯酶PAE穩(wěn)定性好，可重復(fù)利用。本發(fā)明制備的(R)?DMPM的酯化率和e.e._p分別為96.23％和99.12％。

(一)技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種兩步酶法催化制備高光學(xué)純(R)-N-(2,6-二甲基苯基)氨基丙酸甲酯的方法。

(二)背景技術(shù)

由于對減少環(huán)境污染的重視和對綠色化學(xué)合成工藝的倡導(dǎo)，具有特異性藥效以及環(huán)境保護(hù)性的手性農(nóng)藥的開發(fā)成為了農(nóng)藥制備的研究熱點(diǎn)。精甲霜靈是一種由Ciba-Geigy公司首先開發(fā)的酰胺類的殺菌劑，對疫霉病菌、霜酶病菌、腐酶病菌侵染所致的植物病害有特異高效的防治效果。

(R,S)-N-(2,6-二甲基苯基)氨基丙酸甲酯((R)-DMPM)是制備精甲霜靈的關(guān)鍵手性中間體。已經(jīng)有研究表明，R型的甲霜靈的活性比S型的甲霜靈要高20-30倍，有些方面甚至是100倍。因此，制備高純度的(R)-DMPM成為了農(nóng)藥行業(yè)生產(chǎn)高純度精甲霜靈的關(guān)鍵。

目前，制備(R)-DMPM有兩種方法：一種是化學(xué)法，以L-乳酸和2-6-二甲基苯胺為原料進(jìn)行有機(jī)合成，這種化學(xué)合成方法是目前工業(yè)上主要制備(R)-DMPM的方法。工藝十分成熟且可以快速有效的生產(chǎn)，但是反應(yīng)過程復(fù)雜且在合成過程中需要加入有機(jī)溶劑、硫酸等有毒有害物質(zhì)，會對環(huán)境產(chǎn)生污染。所制備的(R)-DMPM的光學(xué)純度只有92％左右，需要進(jìn)行二次提純。還有一種方法為酶法拆分然后化學(xué)甲酯化，通過生物酶將外消旋的甲霜靈進(jìn)行拆分制備高純度的(R)-2,6-二甲基苯基氨基丙酸((R)-MAP-acid)，在酸性條件下再將(R)-MAP-acid和無水甲醇進(jìn)行甲酯化制備(R)-DMPM。這種制備方法相較第一種減少了有害物質(zhì)的排放，減少了能耗，但是在化學(xué)甲酯化的過程中會發(fā)生外消旋，大大降低精甲霜靈的純度，有時候化學(xué)甲酯化制備得到的(R)-DMPM光學(xué)純度會下降到95％以下。

(三)發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是提供一種兩步酶法催化制備高光學(xué)純(R)-DMPM的方法，通過固定化酯酶PAE選擇性水解制備高光學(xué)純(R)-MAP-acid，再通過有機(jī)相反應(yīng)，使用固定化脂肪酶Novozym對第一步酶法制備的(R)-MAP-acid進(jìn)行酶法甲酯化，通過脂肪酶Novozym的特異性來解決手性酸在化學(xué)甲酯化過程中出現(xiàn)的外消旋問題，最終制備得到高純度的(R)-DMPM，為制備精甲霜靈重要中間體探索一條綠色生產(chǎn)路線。

本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：