[發明專利]一種敲減PKR的Marc-145細胞系有效
| 申請號: | 202110966613.0 | 申請日: | 2021-08-23 |
| 公開(公告)號: | CN113699150B | 公開(公告)日: | 2022-04-15 |
| 發明(設計)人: | 肖躍強;楊慧;王文秀;魏鳳;唐娜;李峰;沈志強 | 申請(專利權)人: | 山東省濱州畜牧獸醫研究院 |
| 主分類號: | C12N15/113 | 分類號: | C12N15/113;C12N15/85;C12N5/10;A61K35/22;A61P31/14;A61P31/22 |
| 代理公司: | 濟南泉城專利商標事務所 37218 | 代理人: | 牛芳 |
| 地址: | 256600 山東*** | 國省代碼: | 山東;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索關鍵詞: | 一種 pkr marc 145 細胞系 | ||
1.一種敲減PKR基因的siRNA,其特征在于,其正向和反向核苷酸序列如SEQ ID NO:1-2所示。
2. 一種敲減PKR基因的shRNA,其特征在于,其模板序列的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示。
3. 一種包含如SEQ ID NO:1-2或SEQ ID NO:3所示目的基因序列的表達載體。
4.根據權利要求3所述的表達載體,其特征在于,表達載體選自病毒、真菌或細菌表達載體。
5.一種包含權利要求3或4所述表達載體的細胞,其特征在于,所述的細胞為Marc-145細胞。
6.一種敲減PKR的Marc-145細胞系,其特征在于,PKR蛋白表達量降低不低于90%;
所述敲減PKR的Marc-145細胞系的構建方法包括以下步驟:將含如SEQ ID NO:3所示目的基因序列的表達載體轉染Marc-145細胞系,篩選獲得能夠穩定遺傳的PKR蛋白表達量降低的細胞。
7.一種如權利要求1所述的敲減PKR基因的siRNA,如權利要求2所述的敲減PKR基因的shRNA,如權利要求4所述的表達載體,如權利要求5所述的細胞或如權利要求6所述的敲減PKR的Marc-145細胞系在制備預防和治療新城疫病毒、豬繁殖與呼吸綜合征病毒或豬偽狂犬病毒藥物中的應用。
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