[發明專利]具有阿扎菲酮結構的偶聯試劑及其在制備多肽、蛋白質偶聯物中的應用

有效

• 申請號: 202110966324.0
• 申請日: 2021-08-23
• 公開（公告）號: CN113683590B
• 公開（公告）日: 2023-05-09
• 發明（設計）人: 姚祝軍;伊善東;王歡;魏思媛;奚婕
• 申請（專利權）人: 南京大學
• 主分類號: C07D311/76
• 分類號: C07D311/76;C07D405/12;C07D405/14;A61K47/54;A61K38/08;A61K38/47;A61K38/46;A61K38/10
• 代理公司: 南京眾聯專利代理有限公司 32206
• 代理人: 杜靜靜

本發明屬于有機合成及蛋白質修飾技術領域，特別涉及具有阿扎菲酮結構的偶聯試劑及其在制備多肽、蛋白質偶聯物中的應用，本發明的具有阿扎菲酮結構的多肽、蛋白質偶聯試劑在水溶液中穩定性好，對蛋白質的修飾操作簡單方便，結構新穎，與目前已知的修飾試劑結構都不一樣，偶聯產物的連接穩定性好，為多肽、蛋白質的各種功能化修飾提供了一種新技術和新方式。

技術領域

本發明屬于有機合成及蛋白質修飾技術領域，特別涉及具有阿扎菲酮(azaphilone)結構的偶聯試劑及其在制備多肽、蛋白質偶聯物中的應用。

背景技術

多肽或蛋白質的修飾是有效改善其理化性質，如增加水溶性、延長生物體內作用時間及降低毒副作用等的重要手段。通過特定功能基團(導向基、熒光團、藥物)的引入可以改變多肽或蛋白質在生命體系中的分布、進行生物醫學成像及疾病治療等。一般地，偶聯試劑需要與多肽或蛋白質中的一些官能團進行反應，由于賴氨酸在蛋白質中的含量高(人體蛋白質組中占5.9％)并且通常暴露于蛋白質表面，因此賴氨酸是重要的修飾位點。

目前對多肽或蛋白質中賴氨酸殘基的修飾方法比較單一，經典的修飾方法是使用預先制備的N-羥基琥珀酰亞胺(NHS)酯與賴氨酸殘基形成穩定的酰胺鍵。但是NHS酯在水溶液中易水解，并且會與酪氨酸、絲氨酸和蘇氨酸反應生成副產物，限制了其應用。因此，亟待開發新的賴氨酸偶聯方法，實現對多肽和蛋白質的高效無痕跡修飾。

發明內容

本發明解決現有技術中存在的上述技術問題，提供一類新型的具有阿扎菲酮(azaphilone)結構的多肽和蛋白質偶聯試劑，可以在近生理條件下快速高效地與多肽或蛋白質序列中的賴氨酸殘基化學選擇性地發生O→N插入取代反應，實現對多肽及蛋白質的偶聯。

本發明的技術方案如下：

一類新型的具有阿扎菲酮(azaphilone)結構的多肽、蛋白質偶聯試劑，所述偶聯試劑結構如式(Ⅰ)所示：

其中R¹選自：

H、

R²選自：

H、Cl、Br、I

R³選自：

H、

本發明所述的具有阿扎菲酮(azaphilone)結構的偶聯試劑合成路線如下：

(1)

(2)

(3)

(4)

所述具有阿扎菲酮(azaphilone)結構的多肽、蛋白質偶聯試劑的具體合成步驟為：

(1)以化合物1為初始原料，經過Sonogashira偶聯反應實現化合物1與化合物2的偶聯得化合物3,引入取代基R¹；

(2)化合物3與鹵代試劑反應，在苯環上引入一個鹵素原子得化合物4，引入取代基R²；鹵代試劑選自SO₂Cl₂、N-溴代丁二酰亞胺、N-碘代丁二酰亞胺任意一種；

(3)在硝酸銀和三氟乙酸作用下化合物4發生環異構化生成2-苯并吡喃鹽過渡態,隨后在高價碘試劑IBX作用下發生氧化反應得到化合物5；