[發明專利]一種基于生物酶法合成熊去氧膽酸的純化方法

在審

• 申請號: 202110965271.0
• 申請日: 2021-08-23
• 公開（公告）號: CN113666982A
• 公開（公告）日: 2021-11-19
• 發明（設計）人: 傅榮昭;謝紹慶;劉一平
• 申請（專利權）人: 江西邦泰綠色生物合成生態產業園發展有限公司
• 主分類號: C07J9/00
• 分類號: C07J9/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

1.一種基于生物酶法合成熊去氧膽酸的純化方法，其特征在于，由以下步驟組成：

(1)熊去氧膽酸粗提取：

取生物酶反應后的熊去氧膽酸與蛋白酶的混合物投入反應瓶中，加入甲醇，攪拌升溫至50～60℃，維持溫度1～2h，加入氯化鈣和硅藻土混合物，50～60℃下攪拌1～2h，過濾，用熱的甲醇洗濾餅，將濾液濃縮，然后滴加1倍體積的水，在50～60℃維持1～2h，然后降溫至5～10℃，過濾，將濕品烘干，得到熊去氧膽酸粗品；

(2)熊去氧膽酸三乙胺鹽的制備：

將熊去氧膽酸粗品加入到丙酮中，攪拌升溫至40～50℃，維持溫度1～2h，然后緩慢加入等物質的量的三乙胺，升溫至55℃～60℃回流反應1～2h，然后緩慢將至5～10℃，攪拌2h，過濾，冷丙酮洗滌濾餅，得到濕品熊去氧膽酸三乙胺鹽；

(3)熊去氧膽酸三乙胺鹽的水解：

將步驟(2)的得到的熊去氧膽酸三乙胺鹽濕品投入反應瓶中，加入丙酮和水，攪拌升溫至40～50℃，維持溫度30min至完全溶解后，滴加鹽酸，調節pH至4～5；維持溫度1～2h，將反應瓶內溶劑體積濃縮至原體積的50％～70％，然后將溫度緩慢降至5～10℃，攪拌1h，過濾，用冷水洗濾餅，干燥即得高純度的熊去氧膽酸。

2.根據權利要求1所述的純化方法，其特征在于：在步驟(1)中，硅藻土和氯化鈣的比例為9:1，總加入的質量為熊去氧膽酸理論產量的50％～80％。

3.根據權利要求1所述的純化方法，其特征在于：在步驟(2)中丙酮的量為熊去氧膽酸粗品的8倍體積。

4.根據權利要求1所述的純化方法，其特征在于：在步驟(3)中，丙酮為濕品熊去氧膽酸三乙胺鹽的5倍體積，水為濕品熊去氧膽酸三乙胺鹽的2倍體積。