[發明專利]奧澤沙星中N-亞硝基二甲胺含量的測定方法

有效

• 申請號: 202110965129.6
• 申請日: 2021-08-20
• 公開（公告）號: CN113702523B
• 公開（公告）日: 2023-05-02
• 發明（設計）人: 陳陽;雍春
• 申請（專利權）人: 杭州華東醫藥集團新藥研究院有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02;G01N30/06;G01N30/86
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

本發明提供了一種奧澤沙星中N?亞硝基二甲胺含量的測定方法，其中包括：將奧澤沙星樣品溶解于強堿溶液與甲醇的混合溶劑中，加入二氯甲烷和無機鹽，充分振蕩，靜置分層，取下層二氯甲烷相作為供試品溶液，采用氣相?質譜法檢測樣品中N?亞硝基二甲胺的含量。該方法檢測準確度和靈敏度高、操作簡單方便，方法回收率良好，為奧澤沙星產品的質量控制提供了依據。

技術領域

本發明屬于藥物檢測分析技術領域，具體涉及一種奧澤沙星中N-亞硝基二甲胺含量的測定方法。

背景技術

奧澤沙星(Ozenoxacin)是Ferrer公司研發的非氟化喹諾酮抗菌素，用于治療膿皰性皮炎和其他皮膚感染，包括革蘭氏陽性的皮膚和軟組織感染。奧澤沙星的作用機制為抑制細菌DNA復制酶，DNA促旋酶A和拓撲異構酶IV。奧澤沙星于2015年9年獲日本厚生勞動省批準，成為全球首次批準的新分子實體，于2017年12月11日獲得美國FDA批準上市。奧澤沙星的化學名為1-環丙基-8-甲基-7-[5-甲基-6-(甲基氨基)吡啶-3-基]-4-氧代-1,4-二氫喹啉-3-羧酸，其結構式如下所示：

由于奧澤沙星的合成工藝中使用到N,N-二甲基甲酰胺(DMF)，因此存在N-亞硝基二甲胺(NDMA)的風險。N-亞硝基二甲胺屬于潛在遺傳毒性雜質，其含量超標將嚴重威脅糖尿病患者的健康。美國FDA將NDMA已被分類為2A類致癌物質。根據ICH相關規定，人對N-亞硝基二甲胺的最大攝入量為96ng/d，奧澤沙星的最大日使用量為200mg，96ng/200mg＝0.48ppm，即奧澤沙星中N-亞硝基二甲胺的限度為0.48μg/g。因此，需要對奧澤沙星中殘留的N-亞硝基二甲胺含量進行精確測定研究。

FDA、EP、中國藥典和中國食品藥品檢定研究院均有發布關于NDMA的氣相質譜分析方法。FDA的HS-GCMS測定亞硝胺，使用N-甲基吡咯烷酮(NMP)做樣品溶劑，頂空分析線性范圍在0.025μg～100μg，但奧澤沙星在N-甲基吡咯烷酮中溶解度低，達不到其檢測所需要的濃度水平；中國藥典的GCMS液體進樣法測定亞硝胺，選擇甲醇做樣品溶劑，0.03μg/mL?NDMA的信號噪音比(S/N)為62.1。FDA、中國食品藥品檢定研究院和EP相繼發布了GC-MSMS直接進樣法測定亞硝胺類物質(NDMA、NDEA、NDBA、NAIPA、NEIPA)，其中，鹽酸二甲雙胍中N-亞硝基二甲胺推薦檢測方法2中，選擇1N鹽酸溶解樣品，二氯甲烷萃取后直接進樣，選擇GC-MSMS，進樣體積2μl，脈沖不分流進樣，線性范圍可以做到0.25ng/mL～50ng/mL。但是奧澤沙星1moL/L鹽酸溶液中溶解度小于10mg/mL，該較低的溶解度無法滿足N-亞硝基二甲胺檢測的靈敏度。此外，奧澤沙星在7％磷酸溶液中略溶，在1moL/L氫氧化鈉溶液中溶解度小于30mg/mL，在水中幾乎不溶。

綜上，目前公開的NDMA分析方法無法準確檢測奧澤沙星中NDMA的含量，故尋找一種操作簡單、準確度和靈敏度高、適合工業生產的N-亞硝基二甲胺含量的測定方法。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供一種操作簡單，檢測準確度和靈敏度高，適合工業生產的奧澤沙星中N-亞硝基二甲胺含量的測定方法。

本發明的目的可通過如下技術方案實現：

一種奧澤沙星中N-亞硝基二甲胺含量的測定方法，其中包括：將奧澤沙星樣品溶解于強堿溶液與甲醇的混合溶劑中，加入無機鹽和二氯甲烷，充分振蕩，靜置分層，取下層二氯甲烷相作為供試品溶液，采用氣相-質譜法檢測樣品中N-亞硝基二甲胺的含量。

作為優選，奧澤沙星中N-亞硝基二甲胺含量的測定方法，包括如下步驟：

(a)供試品溶液制備：稱取奧澤沙星樣品溶解于強堿溶液與甲醇的混合溶劑中，加入無機鹽和二氯甲烷，充分振蕩，靜置分層，取下層二氯甲烷相，作為供試品溶液；