[發(fā)明專利]提高中藥多糖得率并調(diào)節(jié)皮膚屏障及免疫的枯草芽孢桿菌

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110963096.1
• 申請日: 2021-08-20
• 公開（公告）號: CN113773985B
• 公開（公告）日: 2023-08-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 崔樹茂;唐鑫;毛丙永;趙建新
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學(xué)
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K31/715;A61P17/16;A61P37/02;C12P19/04;C12R1/125
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠(yuǎn)知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 林娟

本發(fā)明公開了提高中藥多糖得率并調(diào)節(jié)皮膚屏障及免疫的枯草芽孢桿菌，屬于發(fā)酵工程領(lǐng)域。此發(fā)明以中藥原料為唯一碳源，添加了增殖因子和有利于促進(jìn)枯草芽孢桿菌增殖的微量元素，使枯草芽孢桿菌能夠在石斛或黃芪原料發(fā)酵液中快速增殖，以此方式發(fā)酵一定時間，發(fā)酵液中的枯草芽孢桿菌增殖超過10supgt;9/supgt;cfu/mL，發(fā)酵后提取中藥多糖含量較未發(fā)酵提取中藥多糖提取率提升1.13～1.72倍，且在皮膚屏障修復(fù)和免疫調(diào)節(jié)方面均較未發(fā)酵多糖具有顯著提高，顯著提高SDS誘導(dǎo)的HaCaT的細(xì)胞存活率，降低LPS誘導(dǎo)的細(xì)胞中NO含量。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及提高中藥多糖得率并調(diào)節(jié)皮膚屏障及免疫的枯草芽孢桿菌，屬于發(fā)酵工程領(lǐng)域。

背景技術(shù)

石斛是我國一味傳統(tǒng)的名貴中藥，素有“藥中黃金”的美譽(yù)。石斛味甘，性微寒，具有益胃生津，滋陰清熱的功效。研究表明，石斛中含有的主要活性成分為石斛多糖、石斛堿、氨基酸、芪類及其衍生物以及多種揮發(fā)性成分，多糖是其最主要的有效成分，多糖含量的高低決定石斛生物活性的強(qiáng)弱，其具有增強(qiáng)免疫、抗疲勞、抗氧化、降血壓、降血糖、抗腫瘤等作用。

黃芪為豆科植物膜夾黃芪或者內(nèi)蒙古黃芪的干燥根，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》。黃芪性甘,微溫,具有益氣養(yǎng)陽、益肺健脾、保肝利尿等功效。研究表明，黃芪含有多糖、蛋白質(zhì)、生物堿、氨基酸、黃酮及微量元素等多種活性物質(zhì)。黃芪多糖是黃芪主要的活性成分，多糖含量的高低決定黃芪生物活性的強(qiáng)弱，其具有增強(qiáng)免疫、抗疲勞、抗衰老、降血糖、抗腫瘤和抗病毒等作用。

中藥多糖在化妝品原料開發(fā)中具有很好的應(yīng)用前景，目前主要通過酶提法、酸提法、堿提法、水提法、超聲提取等提取多糖并應(yīng)用于化妝品。通過微生物法發(fā)酵中藥提高多糖的提取量近幾年亦有研究，微生物在生長代謝過程中分泌大量的蛋白酶、纖維素酶、半纖維素酶、糖苷酶、淀粉酶、果膠酶等胞外酶，可使植物細(xì)胞破裂，細(xì)胞間隙增大，加快中藥有效成分的溶出，有效提高中藥有效成分的提取率。通過微生物發(fā)酵不僅可以提高多糖的提取率，而且通過微生物的生物轉(zhuǎn)化作用，可以將原有的植物多糖轉(zhuǎn)化成活性更高的新型發(fā)酵多糖；另，部分微生物在發(fā)酵過程中，可利用小分子碳水化合物自身合成胞外多糖，尤其一些乳桿菌和雙歧桿菌等腸道益生菌，利用該微生物發(fā)酵中藥不僅可以純化中藥多糖，而且產(chǎn)生的菌體胞外多糖與中藥多糖起到協(xié)同增效作用。但微生物的上述作用依賴于菌株的代謝酶系，具有很強(qiáng)的菌株特異性，有的菌株無法利用中藥原料進(jìn)行發(fā)酵增殖，有的菌株即使能利用中藥原料增殖亦無法進(jìn)行多糖的生物轉(zhuǎn)化，有的菌株甚至?xí)档投嗵堑幕钚裕軌虍a(chǎn)胞外多糖的菌株亦具有很強(qiáng)的特異性。

皮膚作為人體的第一道防線，對抵御外界有害因素以及維持人體內(nèi)環(huán)境的穩(wěn)態(tài)有著至關(guān)重要的作用。皮膚是抵御外界物質(zhì)進(jìn)入人體和防止體內(nèi)水分丟失的主要屏障，往往皮膚屏障受損和皮膚免疫應(yīng)答反應(yīng)同時發(fā)生。皮膚屏障受損導(dǎo)致皮膚免疫應(yīng)答失調(diào)，而皮膚免疫應(yīng)答失調(diào)會加重皮膚屏障受損，形成惡性循環(huán)。只有在維持皮膚屏障完整性的同時促使皮膚免疫應(yīng)答正常化，才是保證皮膚健康。而石斛多糖和黃芪多糖既可以修復(fù)皮膚屏障功能，又能用于調(diào)節(jié)皮膚免疫。

目前尚無能夠利用石斛原料和黃芪原料進(jìn)行有效發(fā)酵的菌株和發(fā)酵工藝，更沒有菌株或發(fā)酵工藝在提高發(fā)酵多糖得率的同時，提高發(fā)酵多糖在皮膚屏障修復(fù)和皮膚免疫調(diào)節(jié)方面的功效。因此，利用現(xiàn)代發(fā)酵工程技術(shù)使發(fā)酵過程中限制性因素得到解決，使中藥原料得到充分的開發(fā)利用，提高其有效成分多糖得率，篩選出一株益生菌能夠發(fā)酵中藥原料，且發(fā)酵后提取多糖在屏障修復(fù)和免疫調(diào)節(jié)功效方面均提高，具有重要價值。

發(fā)明內(nèi)容

[技術(shù)問題]

目前尚無能夠利用石斛原料和黃芪原料進(jìn)行有效發(fā)酵的菌株和發(fā)酵工藝，更沒有菌株或發(fā)酵工藝在提高發(fā)酵多糖得率的同時，提高發(fā)酵多糖在皮膚屏障修復(fù)和皮膚免疫調(diào)節(jié)方面的功效。

[技術(shù)方案]

為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種枯草芽孢桿菌CCFM1162發(fā)酵多種中藥原料與發(fā)酵后提取多糖的方法，及發(fā)酵中藥多糖在皮膚屏障修復(fù)和皮膚免疫調(diào)節(jié)方面的應(yīng)用。