[發(fā)明專利]提高中藥多糖得率并調(diào)節(jié)皮膚屏障及免疫的枯草芽孢桿菌

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110963096.1
• 申請日: 2021-08-20
• 公開（公告）號: CN113773985B
• 公開（公告）日: 2023-08-25
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 崔樹茂;唐鑫;毛丙永;趙建新
• 申請（專利權(quán)）人: 江南大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A61K31/715;A61P17/16;A61P37/02;C12P19/04;C12R1/125
• 代理公司: 哈爾濱市陽光惠遠知識產(chǎn)權(quán)代理有限公司 23211
• 代理人: 林娟

1.一種枯草芽孢桿菌（Bacillus?subtilis）CCFM1162，于2021年06月07日保藏于廣東省微生物菌種保藏中心，保藏編號為GDMCC?No：61715，保藏地址為廣州市先烈中路100號大院59號樓5樓。

2.一種發(fā)酵中藥原料及提取發(fā)酵多糖的方法，其特征在于，所述方法的具體步驟如下：

（1）將權(quán)利要求1所述的枯草芽孢桿菌CCFM1162接種至以中藥原料為唯一碳源的培養(yǎng)基中進行發(fā)酵，得到發(fā)酵液；

（2）超聲處理步驟（1）中的發(fā)酵液，離心并收集發(fā)酵上清液；在發(fā)酵上清液中加入三氯乙酸，孵育后離心并收集上清液；在上清液中加入乙醇，孵育后離心獲得沉淀；

（3）用超純水復溶步驟（2）中的沉淀后，真空冷凍干燥，獲得發(fā)酵多糖粉末；所述中藥原料為石斛且發(fā)酵多糖為石斛多糖，或所述中藥原料為黃芪且發(fā)酵多糖為黃芪多糖。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟（1）中，培養(yǎng)基的組成包括干重40~80g/L的中藥原料，10~40?g/L的增殖因子和10~40?g/L的無機鹽；所述中藥原料為石斛或黃芪。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的方法，其特征在于，所述中藥原料的制備方法為將新鮮或干燥的中藥原料粉碎至60目以下；所述增殖因子選自酵母浸粉、酵母提取物、酵母蛋白胨、胰蛋白胨或大豆蛋白胨中的一種或多種；所述無機鹽選自氯化鈉、無水乙酸鈉、檸檬酸氫二銨、磷酸氫二鉀中的一種或多種；所述中藥原料為石斛或黃芪。

5.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟（1）中，枯草芽孢桿菌的接種量為1.0×10⁶~1.0×10⁷?cfu/mL；發(fā)酵的條件為：溫度為32~38℃，pH為5.5~7.0，發(fā)酵時間為15~24h。

6.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟（2）中，超聲處理的條件為：溫度25~80℃，超聲功率200~500?w，時間為10~30?min。

7.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，步驟（2）中，三氯乙酸的濃度為750~850?g/L，以質(zhì)量比2%~5%的添加量添加至發(fā)酵上清液中，孵育時間為30~60?min，溫度為0~4℃；乙醇的濃度為90~95%，孵育時間為12~16?min，溫度為0~4℃。

8.利用權(quán)利要求2~7任一所述方法制備得到的含石斛多糖的組合物或含黃芪多糖的組合物。

9.權(quán)利要求8所述含石斛多糖的組合物或含黃芪多糖的組合物在制備預防或治療皮膚屏障修護和/或皮膚免疫調(diào)節(jié)的產(chǎn)品中的應用。