[發(fā)明專利]一種乳酸乳球菌的快速活化方法及其在酸奶中的應(yīng)用

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• 申請日: 2021-08-20
• 公開（公告）號: CN113621542A
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 殷世清;張甲慶;朱永真;徐靖洋;張鳳龍;李艷琪
• 申請（專利權(quán)）人: 江蘇漢肽生物醫(yī)藥有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;C12N1/04;A23C9/123;A23C9/12;C12R1/01
• 代理公司: 淄博川誠知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(特殊普通合伙) 37275
• 代理人: 高鵬飛

1.一種乳酸乳球菌的快速活化方法，其特征在于，所述活化方式包括：

S101：菌種活化，從-80℃冰箱中取出乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)LL47原始出發(fā)菌株，于冰上解凍，接種于M17培養(yǎng)基中，于30℃、180rpm條件下培養(yǎng)16h，鏡檢合格后再接入到M17培養(yǎng)基中，30℃條件下培養(yǎng)16h，經(jīng)過2代液體培養(yǎng)；

S102：菌種培養(yǎng)，將步驟S101中的復(fù)壯完成的液體菌種，按照1％的接種量接種到M17培養(yǎng)基中，于30℃、180rpm條件下培養(yǎng)10～16h，獲得發(fā)酵菌種；

S103：菌種保藏，將步驟S102中獲得發(fā)酵菌種，經(jīng)10000rpm、2min離心獲得菌泥；向菌泥中加入發(fā)酵體積量20～40％的M17培養(yǎng)基和10～30％的甘油，重懸混勻，轉(zhuǎn)入凍存管中，放入-80℃溫度下保存，得到凍存種子，以備使用；

S104：活力評價(jià)，將步驟S103中的凍存種子，解凍后按1％的接種量接種到M17培養(yǎng)基中，于30℃、180rpm條件下培養(yǎng)16h，每隔2h，測定一次OD₆₀₀，選取OD₆₀₀增長最快工藝，作為最佳菌種保存方式。

2.一種乳酸乳球菌在酸奶中的應(yīng)用，其特征在于，所述應(yīng)用包括：

步驟1：酸奶發(fā)酵劑制作，取乳酸乳球菌(Lactococcus lactis)LL47凍存種子，按1％的接種量接種到發(fā)酵培養(yǎng)基中，于30℃、180rpm條件下培養(yǎng)6～10h，完成酸奶發(fā)酵劑制作；

步驟2：酸奶發(fā)酵，將步驟1中的酸奶發(fā)酵劑，按照5％的接種量，接種到牛奶中，先于30℃、100rpm條件下培養(yǎng)1h，后于30℃條件下，靜置發(fā)酵，得到酸奶。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種乳酸乳球菌在酸奶中的應(yīng)用，其特征在于，包括：

在步驟1中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基包含以下組份：葡萄糖10～50g/L，氮源10～50g/L，碳酸鈣0.2～10g/L，磷酸二氫鉀0.2～10g/L，其余為水。

4.根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種乳酸乳球菌在酸奶中的應(yīng)用，其特征在于，包括：

在步驟1中，所述發(fā)酵培養(yǎng)基的pH為7.0±0.1。

5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種乳酸乳球菌在酸奶中的應(yīng)用，其特征在于，包括：

所述氮源為食用酵母粉、麩皮浸出液和全脂奶粉的任意一種或幾種的組合。

6.根據(jù)權(quán)利要求3或5任一項(xiàng)所述的一種乳酸乳球菌在酸奶中的應(yīng)用，其特征在于，包括：

所述發(fā)酵培養(yǎng)基包含以下組份：葡萄糖20g/L，食用酵母粉15g/L，麩皮浸出液20g/L，全脂奶粉5g/L，碳酸鈣3g/L，磷酸二氫鉀2g/L，其余為水。

7.根據(jù)權(quán)利要求5所述的一種乳酸乳球菌在酸奶中的應(yīng)用，其特征在于，包括：

所述麩皮浸出液的制備方法包括以下步驟：稱取麩皮，加入適量水，攪拌均勻后，開始在在攪拌條件下煮沸處理40min；然后使用100目紗布過濾，獲得麩皮浸出液。