[發明專利]野生白鬼筆組織分離制備母種方法

在審

• 申請號: 202110959696.0
• 申請日: 2021-08-20
• 公開（公告）號: CN113647296A
• 公開（公告）日: 2021-11-16
• 發明（設計）人: 劉鵬;鄭治洪;曹永直;彭成江;邵先強;文玉朝
• 申請（專利權）人: 德江縣綠通天麻發展有限公司
• 主分類號: A01G18/40
• 分類號: A01G18/40;A01G18/20;H01B13/00
• 代理公司: 重慶智誠達邦專利代理事務所(普通合伙) 50289
• 代理人: 龔世妍

本發明公開了野生白鬼筆組織分離制備母種方法，涉及農業科技技術領域。本發明以自然野外生長的白鬼筆菌蕾和開傘白鬼筆為分離原材料，通過無菌處理，獲得無菌分離材料菌托包被，將菌托包被分離在專用母種培養基上培養，待菌絲萌發后轉移至專用木屑培養基中獲得木屑培養基母種，再通過菌絲尖端提純復壯得到純化母種，最后通過子實體組織分離進行系統選育，經過系統培育，人工馴化，得到性狀穩定、可用于繁殖生產的白鬼筆木屑母種。本發明公開了野生白鬼筆組織分離制備母種方法，能夠有效的利用采集的白鬼筆野生資源，解決菌蕾成熟或已開傘的白鬼筆難以有效分離的難題，為白鬼筆的優質種源收集和良種選育奠定了技術基礎。

技術領域

本發明涉及農業科技技術領域，尤其涉及野生白鬼筆組織分離制備母種方法。

背景技術

白鬼筆(Phallus impudicus L.ex.Pers.)，又稱竹下菌、男蓀、無裙蓀等，為擔子菌綱、鬼筆目、鬼筆科、鬼筆屬真菌。夏秋冬季于林下腐殖質層中單生或群生，分布于貴州、四川、云南、安徽、廣東等地。白鬼筆是一種珍稀食用菌，菌體潔白，味道鮮美，口感松脆、細嫩、爽口，營養豐富，含近二十種氨基酸，還含有人體所需的十多種維生素及多種微量元素，是一種極佳的營養滋品。

白鬼筆菌柄可入藥，藥性為甘，淡，性溫，有活血止痛，祛風除濕的功效，可用于治療風濕痛。白鬼筆還能抑制腐敗菌生長，可作為食品的短期防腐劑。白鬼筆在國外，如法國和德國的一些地區也深受消費者青睞，超市里常有新鮮或者腌制的白鬼筆銷售，國內主要銷往北京、上海、天津、昆明等城市。

目前對白鬼筆的研究很多，如2013年桂陽對白鬼筆的出菇特性進行了闡述；2010年盧東升對白鬼筆的菌蕾、子實體以及菌絲形態征進行了大致的研究闡述，但是對于白鬼筆的菌種制作技術，研究則相對較少。目前，白鬼筆菌種的獲取方法主要是采集未成熟的菌蛋用木屑培養基進行組織分離，很少有菌種制作單位采用斜面進行分離，也沒有進行菌種的組織分離的相關研究。

發明內容

針對上述問題，本發明的目的在于公開野生白鬼筆組織分離制備母種方法，能夠有效的利用采集的白鬼筆野生資源，解決菌蕾成熟或已開傘的白鬼筆難以有效分離的難題，為白鬼筆的優質種源收集和良種選育奠定了技術基礎。

具體的，本發明的野生白鬼筆組織分離制備母種方法，所述方法是采用野生白鬼筆的菌柄包被組織進行組織分離并純化后得到母種。

進一步，所述方法具體包括以下步驟：

S1：采集自然野外生長的白鬼筆菌蕾和開傘白鬼筆，獲得分離原材料；

S2：通過無菌處理，獲得無菌分離材料菌柄包被，將菌柄包被轉入母種培養基中進行培養；

S3：培養至菌絲萌發轉移至木屑培養基中獲得木屑培養基母種；

S4：通過菌絲尖端提純復壯得到純化母種，轉接原種、栽培種，最后通過仿野生種植進行栽培得到子實體；

S5：通過子實體組織分離進行系統選育，經過3-5年的系統培育，人工馴化，得到性狀穩定、可用于繁殖生產的白鬼筆母種。

進一步，所述S2步驟具體為：在無菌超凈臺上，對于未開傘的白鬼筆菌蕾，用75％酒精浸泡表面消毒后，用無菌吸水紙吸干表面水分，再用灼燒燙的解剖刀縱向切開菌蕾，用無菌鑷子夾掉菌柄，使菌柄包被露出，夾取菌柄包被大小為5mm見方的組織轉入母種培養基中進行培養；

對于開傘白鬼筆，先齊菌托處切掉菌柄，將子實體倒立用75％酒精沖洗干凈，再用無菌水沖洗，最后用無菌紙擦拭，用無菌鑷子分開菌托，去掉菌柄，再用無菌鑷子夾取菌柄包被大小為5mm見方的組織轉入母種培養基中進行培養。

進一步，每升所述母種培養基包括以下原料：青杠木屑40g，箭竹葉10g，馬鈴薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，瓊脂粉10g，磷酸二氫鉀1g，硫酸鎂0.5g。