[發(fā)明專利]野生白鬼筆組織分離制備母種方法

在審

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• 申請日: 2021-08-20
• 公開（公告）號: CN113647296A
• 公開（公告）日: 2021-11-16
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉鵬;鄭治洪;曹永直;彭成江;邵先強;文玉朝
• 申請（專利權(quán)）人: 德江縣綠通天麻發(fā)展有限公司
• 主分類號: A01G18/40
• 分類號: A01G18/40;A01G18/20;H01B13/00
• 代理公司: 重慶智誠達邦專利代理事務(wù)所(普通合伙) 50289
• 代理人: 龔世妍

1.野生白鬼筆組織分離制備母種方法，其特征在于，所述方法是采用野生白鬼筆的菌柄包被組織進行組織分離并純化后得到母種。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的野生白鬼筆組織分離制備母種方法，其特征在于，所述方法具體包括以下步驟：

S1：采集自然野外生長的白鬼筆菌蕾和開傘白鬼筆，獲得分離原材料；

S2：通過無菌處理，獲得無菌分離材料菌柄包被，將菌柄包被轉(zhuǎn)入母種培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)；

S3：培養(yǎng)至菌絲萌發(fā)轉(zhuǎn)移至木屑培養(yǎng)基中獲得木屑培養(yǎng)基母種；

S4：通過菌絲尖端提純復(fù)壯得到純化母種，轉(zhuǎn)接原種、栽培種，最后通過仿野生種植進行栽培得到子實體；

S5：通過子實體組織分離進行系統(tǒng)選育，經(jīng)過3-5年的系統(tǒng)培育，人工馴化，得到性狀穩(wěn)定、可用于繁殖生產(chǎn)的白鬼筆母種。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的野生白鬼筆組織分離制備母種方法，其特征在于，所述S2步驟具體為：在無菌超凈臺上，對于未開傘的白鬼筆菌蕾，用75％酒精浸泡表面消毒后，用無菌吸水紙吸干表面水分，再用灼燒燙的解剖刀縱向切開菌蕾，用無菌鑷子夾掉菌柄，使菌柄包被露出，夾取菌柄包被大小為5mm見方的組織轉(zhuǎn)入母種培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)；

對于開傘白鬼筆，先齊菌托處切掉菌柄，將子實體倒立用75％酒精沖洗干凈，再用無菌水沖洗，最后用無菌紙擦拭，用無菌鑷子分開菌托，去掉菌柄，再用無菌鑷子夾取菌柄包被大小為5mm見方的組織轉(zhuǎn)入母種培養(yǎng)基中培養(yǎng)。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的野生白鬼筆組織分離制備母種方法，其特征在于，每升所述母種培養(yǎng)基包括以下原料：青杠木屑40g，箭竹葉10g，馬鈴薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，瓊脂粉10g，磷酸二氫鉀1g，硫酸鎂0.5g。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的野生白鬼筆組織分離制備母種方法，其特征在于，所述木屑培養(yǎng)基包括以下重量份原料：青杠木屑78重量份，麥麩20重量份，磷酸二氫鉀1重量份，硫酸鎂0.5重量份，石膏0.5重量份。

6.根據(jù)權(quán)利要求1-5任一權(quán)利要求所述的野生白鬼筆組織分離制備母種方法，其特征在于，所述S3步驟中，當菌絲萌發(fā)至1-2cm轉(zhuǎn)移至木屑培養(yǎng)基中。