[發明專利]野生竹蓀組織分離制備母種方法

在審

• 申請號: 202110959301.7
• 申請日: 2021-08-20
• 公開（公告）號: CN113647295A
• 公開（公告）日: 2021-11-16
• 發明（設計）人: 劉鵬;鄭治洪;曹永直;彭成江;邵先強;文玉朝
• 申請（專利權）人: 德江縣綠通天麻發展有限公司
• 主分類號: A01G18/40
• 分類號: A01G18/40;A01G18/20;C05G3/40;C05G3/60;C05G5/35
• 代理公司: 重慶智誠達邦專利代理事務所(普通合伙) 50289
• 代理人: 龔世妍

本發明公開了野生竹蓀組織分離制備母種方法，涉及農業科技技術領域。本發明的野生竹蓀組織分離制備母種方法，所述方法是以自然野外生長的竹蓀菌蕾或開傘竹蓀為原材料，經過組織分離得到菌柄包被，最后培養并純化后得到母種。本發明公開了野生竹蓀組織分離制備母種方法，能夠有效的利用采集的竹蓀野生資源，解決菌蕾成熟或已開傘的竹蓀難以有效分離的難題，為竹蓀的優質種源收集和良種選育奠定了技術基礎。

技術領域

本發明涉及農業科技技術領域，尤其涉及野生竹蓀組織分離制備母種方法。

背景技術

竹蓀(Dictyophora indusiata(Vent.ex Pers)Fisch)又名竹笙、竹參，常見并可供食用的有4種：長裙竹蓀、短裙竹蓀、棘托竹蓀和紅托竹蓀，是寄生在枯竹根部的一種隱花菌類，形狀略似網狀干白蛇皮，它有深綠色的菌帽，雪白色的圓柱狀的菌柄，粉紅色的蛋形菌托，在菌柄頂端有一圍細致潔白的網狀裙從菌蓋向下鋪開，被人們稱為“雪裙仙子”、“山珍之花”、“真菌之花”、“菌中皇后”。竹蓀營養豐富，香味濃郁，滋味鮮美，自古就列為“草八珍”之一。

竹蓀幼擔子果菌蕾呈圓球形，具三層包被，外包被薄，光滑，灰白色或淡褐紅色；中層膠質；內包被堅韌肉質。成熟時包被裂開，菌柄將菌蓋頂出，柄中空，高15～20cm，白色，外表由海綿狀小孔組成；包被遣留于柄下部形成菌托；菌蓋生于柄頂端呈鐘形，蓋表凹凸不平呈網格，凹部分密布擔孢子；蓋下有白色網狀菌幕，下垂如裙，長達8厘米以上；孢子光滑，透明，橢圓形，3～3.5×1.5～2微米。

目前竹蓀菌種的獲取方法主要是采集未成熟的菌蛋用瓊脂培養基進行組織分離，但是成功率不是很高，且在培養的過程中，還會出現膨大等不良現象。

發明內容

針對上述問題，本發明的目的在于公開野生竹蓀組織分離制備母種方法，能夠有效的利用采集的竹蓀野生資源，解決菌蕾成熟或已開傘的竹蓀難以有效分離的難題，為竹蓀的優質種源收集和良種選育奠定了技術基礎。

具體的，本發明的野生竹蓀組織分離制備母種方法，所述方法是以自然野外生長的竹蓀菌蕾或開傘竹蓀為原材料，經過組織分離得到菌柄包被，最后培養并純化后得到母種。

進一步，對于未開傘的竹蓀菌蕾，所述組織分離得到菌柄包被的具體操作為：在無菌超凈臺上，用75％酒精浸泡表面消毒后，用無菌吸水紙吸干表面水分，再用灼燒燙的解剖刀縱向切開菌蕾，用無菌鑷子夾掉菌柄，使菌柄包被露出，夾取菌柄包被大小為5mm見方的組織轉入母種培養基中進行培養。

進一步，對于開傘竹蓀，所述組織分離得到菌柄包被的具體操作為：先齊菌托處切掉菌柄，將子實體倒立用75％酒精沖洗干凈，再用無菌水沖洗，最后用無菌紙擦拭，用無菌鑷子分開菌托，去掉菌柄，再用無菌鑷子夾取菌柄包被大小為5mm見方的組織轉入母種培養基中培養。

進一步，所述方法具體包括以下步驟：

S1：采集自然野外生長的竹蓀菌蕾和開傘竹蓀，獲得分離原材料；

S2：通過無菌處理，獲得無菌分離材料菌柄包被，將菌柄包被轉入母種培養基中進行培養；

S3：培養至菌絲萌發轉移至木屑培養基中獲得木屑培養基母種；

S4：通過菌絲尖端提純復壯得到純化母種，轉接原種、栽培種，最后通過仿野生種植進行栽培得到子實體；

S5：通過子實體組織分離進行系統選育，經過3-5年的系統培育，人工馴化，得到性狀穩定、可用于繁殖生產的竹蓀母種。

進一步，每升所述母種培養基包括以下原料：青杠木屑40g，箭竹葉10g，馬鈴薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，瓊脂粉10g，磷酸二氫鉀1g，硫酸鎂0.5g。

進一步，所述木屑培養基包括以下重量份原料：青杠木屑78重量份，麥麩20重量份，磷酸二氫鉀1重量份，硫酸鎂0.5重量份，石膏0.5重量份。