[發明專利]野生竹蓀組織分離制備母種方法

在審

• 申請號: 202110959301.7
• 申請日: 2021-08-20
• 公開（公告）號: CN113647295A
• 公開（公告）日: 2021-11-16
• 發明（設計）人: 劉鵬;鄭治洪;曹永直;彭成江;邵先強;文玉朝
• 申請（專利權）人: 德江縣綠通天麻發展有限公司
• 主分類號: A01G18/40
• 分類號: A01G18/40;A01G18/20;C05G3/40;C05G3/60;C05G5/35
• 代理公司: 重慶智誠達邦專利代理事務所(普通合伙) 50289
• 代理人: 龔世妍

1.野生竹蓀組織分離制備母種方法，其特征在于，所述方法是以自然野外生長的竹蓀菌蕾或開傘竹蓀為原材料，經過組織分離得到菌柄包被，最后培養并純化后得到母種。

2.根據權利要求1所述的野生竹蓀組織分離制備母種方法，其特征在于，對于未開傘的竹蓀菌蕾，所述組織分離得到菌柄包被的具體操作為：在無菌超凈臺上，用75％酒精浸泡表面消毒后，用無菌吸水紙吸干表面水分，再用灼燒燙的解剖刀縱向切開菌蕾，用無菌鑷子夾掉菌柄，使菌柄包被露出，夾取菌柄包被大小為5mm見方的組織轉入母種培養基中進行培養。

3.根據權利要求1所述的野生竹蓀組織分離制備母種方法，其特征在于，對于開傘竹蓀，所述組織分離得到菌柄包被的具體操作為：先齊菌托處切掉菌柄，將子實體倒立用75％酒精沖洗干凈，再用無菌水沖洗，最后用無菌紙擦拭，用無菌鑷子分開菌托，去掉菌柄，再用無菌鑷子夾取菌柄包被大小為5mm見方的組織轉入母種培養基中培養。

4.根據權利要求1-3任一權利要求所述的野生竹蓀組織分離制備母種方法，其特征在于，所述方法具體包括以下步驟：

S1：采集自然野外生長的竹蓀菌蕾和開傘竹蓀，獲得分離原材料；

S2：通過無菌處理，獲得無菌分離材料菌柄包被，將菌柄包被轉入母種培養基中進行培養；

S3：培養至菌絲萌發轉移至木屑培養基中獲得木屑培養基母種；

S4：通過菌絲尖端提純復壯得到純化母種，轉接原種、栽培種，最后通過仿野生種植進行栽培得到子實體；

S5：通過子實體組織分離進行系統選育，經過3-5年的系統培育，人工馴化，得到性狀穩定、可用于繁殖生產的竹蓀母種。

5.根據權利要求4所述的野生竹蓀組織分離制備母種方法，其特征在于，每升所述母種培養基包括以下原料：青杠木屑40g，箭竹葉10g，馬鈴薯200g，葡萄糖20g，蛋白胨5g，瓊脂粉10g，磷酸二氫鉀1g，硫酸鎂0.5g。

6.根據權利要求5所述的野生竹蓀組織分離制備母種方法，其特征在于，所述母種培養基的原料還包括營養緩釋顆粒，所述營養緩釋顆粒是以營養緩釋膠囊為內核，內核外包裹了復合膜層，所述內核和復合膜層之間填充有香樟木提取液。

7.根據權利要求6所述的野生竹蓀組織分離制備母種方法，其特征在于，所述營養緩釋膠囊是以營養液為囊芯，海藻酸鈉/膠原蛋白復合材料為囊皮。

8.根據權利要求4所述的野生竹蓀組織分離制備母種方法，其特征在于，所述木屑培養基包括以下重量份原料：青杠木屑78重量份，麥麩20重量份，磷酸二氫鉀1重量份，硫酸鎂0.5重量份，石膏0.5重量份。

9.根據權利要求4所述的野生竹蓀組織分離制備母種方法，其特征在于，所述S3步驟中，當菌絲萌發至1-2cm轉移至木屑培養基中。