[發(fā)明專利]基于藥物基因多態(tài)性及血栓彈力圖的血小板治療指導(dǎo)方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110912116.2
• 申請(qǐng)日: 2021-08-10
• 公開（公告）號(hào): CN113403389A
• 公開（公告）日: 2021-09-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 陳文亞;毛倫林;季莉莉;馬愛金;劉志清;王利惠;張金;王佳佳;黃婷婷
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 常州市武進(jìn)人民醫(yī)院
• 主分類號(hào): C12Q1/6883
• 分類號(hào): C12Q1/6883;C12Q1/6869
• 代理公司: 濟(jì)南市新圖新夏天專利代理事務(wù)所(普通合伙) 37330
• 代理人: 陳體芝

1.基于藥物基因多態(tài)性及血栓彈力圖的血小板治療指導(dǎo)方法，其特征在于，包括以下步驟：

S1、藥物基因檢測(cè)：通過PCR和Sanger法測(cè)序技術(shù)檢測(cè)阿司匹林和氯吡格雷相關(guān)的基因多態(tài)性位點(diǎn)；

S2、全血基因組DNA測(cè)序：取靜脈血2ml于EDTA 抗凝管中，利用全血基因組DNA提取試劑盒來提取DNA，再將提取的DNA進(jìn)行PCR 擴(kuò)增，最后將擴(kuò)增產(chǎn)物使用測(cè)序儀進(jìn)行測(cè)序；

S3、進(jìn)行代謝型分類：根據(jù)基因型進(jìn)行代謝型分類，分為強(qiáng)代謝型和弱代謝型；

S4、TEG 檢測(cè)：使用 TEG5000 型凝血分析儀對(duì)肘靜脈血進(jìn)行分析，2h 內(nèi)檢測(cè) AA 途徑誘導(dǎo)的血小板抑制率（AA%）和 ADP 受體途徑誘導(dǎo)的血小板抑制率（ADP%）；

S5、結(jié)果分析：AA 抑制率＜50%，定義為 AR；ADP 抑制率＜30%，定義為 CR。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的基于藥物基因多態(tài)性及血栓彈力圖的血小板治療指導(dǎo)方法，其特征在于，所述S1中，阿司匹林相關(guān)基因檢測(cè)COX-1（AG）、ITGB3（TC）基因，其中G、C為阿司匹林抵抗相關(guān)等位基因；氯吡格雷相關(guān)基因檢測(cè)CYP2C19基因*2（681G/A）、*3（636G/A）、*17（-806C/T）。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的基于藥物基因多態(tài)性及血栓彈力圖的血小板治療指導(dǎo)方法，其特征在于，所述S2中，DNA測(cè)序前經(jīng)過酶切反應(yīng)，酶切反應(yīng)條件：變性：94℃，5min，94℃，30s；退火：56℃，20s；延伸：72℃，20s；

共35個(gè)循環(huán)，最后72℃延伸5min。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的基于藥物基因多態(tài)性及血栓彈力圖的血小板治療指導(dǎo)方法，其特征在于，功能缺失等位基因攜帶者為至少有 1 個(gè)功能缺失等位基因的患者：*1/*2、*1/*3、*2/*2、*2/*3、*3/*3、*2/*17 或*3/*17；功能缺失等位基因非攜帶者為無功能缺失等位基因的患者：*1/*1，*1/*17，或*17/*17。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的基于藥物基因多態(tài)性及血栓彈力圖的血小板治療指導(dǎo)方法，其特征在于，所述S4中，根據(jù) CYP2C19 *2、*3和*17 基因型進(jìn)行代謝型分類，分為強(qiáng)代謝型：野生型純合子組CYP2C19*1/*1的快代謝型、CYP2C19*1/*17 的超快代謝型；

弱代謝型：野生型與突變基因雜合子組：CYP2C19*1/*2 和 *1/*3的中間代謝型、突變基因純合子或雜合子組：CYP2C19*2/*2、2/*3 和 *3/*3的慢代謝型。

6.根據(jù)權(quán)利要求1或5所述的基于藥物基因多態(tài)性及血栓彈力圖的血小板治療指導(dǎo)方法，其特征在于，所述凝血分析試劑包括高嶺土、激活劑、花生四烯酸和二磷酸腺苷。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的基于藥物基因多態(tài)性及血栓彈力圖的血小板治療指導(dǎo)方法，其特征在于，所有數(shù)據(jù)均采用 SPSS17.0 統(tǒng)計(jì)軟件包進(jìn)行處理。

8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的基于藥物基因多態(tài)性及血栓彈力圖的血小板治療指導(dǎo)方法，其特征在于，計(jì)量資料符合正態(tài)分布的采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（）表示，不符合正態(tài)分布的采用中位數(shù)，兩組間均數(shù)比較采用獨(dú)立樣本 t 檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料用例數(shù)和百分率表示，組間比較采用χ² 檢驗(yàn)。

9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的基于藥物基因多態(tài)性及血栓彈力圖的血小板治療指導(dǎo)方法，其特征在于，所有檢驗(yàn)均為雙側(cè)檢驗(yàn)，以 P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。