[發明專利]一種NIR響應型仿生膜納米囊泡及其構建方法和應用

有效

• 申請號: 202110909837.8
• 申請日: 2021-08-09
• 公開（公告）號: CN113559066B
• 公開（公告）日: 2023-03-21
• 發明（設計）人: 譚亞南;關新元;李詠梅;李珊珊;羅敏
• 申請（專利權）人: 香港大學深圳醫院;先進能源科學與技術廣東省實驗室
• 主分類號: A61K9/127
• 分類號: A61K9/127;A61K41/00;A61K45/00;A61K47/46;A61K49/00;A61P35/00;A61P35/04
• 代理公司: 深圳市合道英聯專利事務所(普通合伙) 44309
• 代理人: 廉紅果

1.一種NIR響應型仿生膜納米囊泡的構建方法，其特征在于，該構建方法包括以下步驟：

S1、收集腫瘤細胞，依次采用凍融法、梯度離心和重懸，獲得腫瘤細胞膜溶液；

S2、采用溶劑擴散法，獲得熱敏脂質給藥系統；具體方法為：

S21、將PD-1/PD-L1抑制劑、IR-780碘化物修飾脂質嫁接物、熱敏脂質DPPC以及膽固醇溶解于乙醇中，且在50～70℃的水浴中加熱，得到乙醇相溶液；

其中，所述乙醇相溶液中PD-1/PD-L1抑制劑的質量百分比為5～20％、IR-780碘化物修飾脂質嫁接物的質量百分比為10～20％、熱敏脂質DPPC的質量百分比為65～75％、膽固醇的質量百分比為3～6％；

S22、按照F68水溶液與乙醇相溶液的體積比為(8～12)∶1的比例量取F68水溶液，并在55～65℃條件下，將所述乙醇相溶液快速分散至F68水溶液中，且在300～600rpm的轉速下攪拌5～10min，再冷卻至室溫，制備得到熱敏脂質給藥系統；

此外，所述IR-780碘化物修飾脂質嫁接物是通過以下方法獲得：

S211、稱取5～15mg的IR-780碘化物和20～50mg的NH₂-PEG-DSPE，溶于二氯甲烷溶液中，得到含有IR-780碘化物的二氯甲烷溶液；

S212、以三乙胺為縛酸劑，按三乙胺與IR-780碘化物的摩爾比為(1～3)∶1的比例稱取三乙胺，并加至所述含有IR-780碘化物的二氯甲烷溶液中，室溫攪拌反應8～30h；

S213、反應結束后，將反應溶液加入至8～12倍體積的無水乙醚中，3～5℃條件下過夜，而后在轉速為2500～3500rpm的條件下離心4～6min，去除副產物，再將沉淀物干燥，得到IR-780碘化物修飾脂質嫁接物；

S3、將所述腫瘤細胞膜溶液與熱敏脂質給藥系統混合，并用脂質體擠出器擠出和過濾，得到NIR響應型仿生膜納米囊泡；所述腫瘤細胞膜溶液與熱敏脂質給藥系統的質量比為1∶(1～5)；所述腫瘤細胞膜溶液的濃度為0.5～2mg/mL。

2.根據權利要求1所述的一種NIR響應型仿生膜納米囊泡的構建方法，其特征在于，所述S3中，所述過濾時，是依次采用450～350nm、250～150nm、150～50nm的聚碳酸酯濾膜進行過濾。

3.根據權利要求2所述的一種NIR響應型仿生膜納米囊泡的構建方法，其特征在于，所述S21中，所述PD-1/PD-L1抑制劑為BMS-1、BMS-1001、BMS202、BMS-1166中的至少一種。

4.根據權利要求2所述的一種NIR響應型仿生膜納米囊泡的構建方法，其特征在于，所述S22中，所述F68水溶液的濃度為0.5～1.5mg/mL。

5.一種如權利要求1-4任意一項所述的構建方法制得的NIR響應型仿生膜納米囊泡。

6.一種如權利要求5所述的NIR響應型仿生膜納米囊泡在制備腫瘤組織光熱響應釋放免疫檢查點阻斷劑中的應用。

7.一種如權利要求5所述的NIR響應型仿生膜納米囊泡在制備抑制腫瘤生長與轉移的光熱免疫聯合制劑中的應用。