[發(fā)明專利]一種超聲誘變的鼠傷寒沙門氏菌hisD基因InDel分子標(biāo)記及應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202110909368.X | 申請(qǐng)日： | 2021-08-09 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN113736895A | 公開（公告）日： | 2021-12-03 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 阮思煜;李云亮;馬海樂;紀(jì)耀勇;周安奇;謝鵬飛;趙博博;劉曉霜;徐雅宣;吳燕伶 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 江蘇大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/689 | 分類號(hào)： | C12Q1/689;C12Q1/6858;C12Q1/02;C12N15/11;C12R1/42 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 212013 江*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 一種 超聲 誘變 傷寒 沙門氏菌 hisd 基因 indel 分子 標(biāo)記 應(yīng)用 | ||
1. 一種超聲誘變的鼠傷寒沙門氏菌hisD基因InDel分子標(biāo)記，其特征在于，所述InDel分子標(biāo)記為鼠傷寒沙門氏菌hisD基因第832位堿基到第915位堿基，其核苷酸序列如SEQ IDNO. 4所示。
2.權(quán)利要求1所述的超聲誘變的鼠傷寒沙門氏菌hisD基因InDel分子標(biāo)記由如下特異性分子標(biāo)記引物擴(kuò)增得到，其特征在于，所述引物序列為：
hisDRC（F）：5'-GTCAGGTCAGCCAGCGTCT-3'；
hisDRC（R）：5'- GTAATCGCATCCACCAAATC -3'。
3.一種用于檢測(cè)權(quán)利要求1所述的超聲誘變的鼠傷寒沙門氏菌hisD基因InDel分子標(biāo)記的引物，所述引物的核苷酸序列為：
hisDRC（F）：5'-GTCAGGTCAGCCAGCGTCT-3'；
hisDRC（R）：5'- GTAATCGCATCCACCAAATC -3'。
4.權(quán)利要求1所述的超聲誘變的鼠傷寒沙門氏菌hisD基因InDel分子標(biāo)記在基因回復(fù)突變插入或者缺失的判定中的應(yīng)用。
5.權(quán)利要求1所述的超聲誘變的鼠傷寒沙門氏菌hisD基因InDel分子標(biāo)記在分析hisD基因序列與其所編碼蛋白質(zhì)功能的關(guān)系中的應(yīng)用。
6.一種的檢測(cè)hisD基因寡核苷酸插入或缺失的方法，其特征在于，通過采用權(quán)利要求3所述的特異性引物擴(kuò)增分子標(biāo)記部分，所述引物的核苷酸序列為：
hisDRC（F）：5'-GTCAGGTCAGCCAGCGTCT-3'；
hisDRC（R）：5'- GTAATCGCATCCACCAAATC -3'。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的檢測(cè)hisD基因InDel核心突變區(qū)的寡核苷酸插入或缺失的方法，其特征在于，所述方法為以組氨酸營(yíng)養(yǎng)缺陷型鼠傷寒沙門氏菌hisD基因的DNA擴(kuò)增產(chǎn)物為對(duì)照，通過PAGE電泳分析，如果兩者擴(kuò)增條帶有大小差異，則發(fā)生了寡核苷酸插入或缺失回復(fù)突變。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的檢測(cè)hisD基因InDel核心突變區(qū)的寡核苷酸插入或缺失的方法，其特征在于，所述方法中，可以將擴(kuò)增產(chǎn)物經(jīng)測(cè)序分析其具體的插入或缺失寡核苷酸序列。
9.權(quán)利要求6~8任一項(xiàng)所述的檢測(cè)方法在脈沖電場(chǎng)、分秒激光等物理場(chǎng)誘變鼠傷寒沙門氏菌回復(fù)突變檢測(cè)中的應(yīng)用。
10.一種用于檢測(cè)權(quán)利要求1所述的超聲誘變的鼠傷寒沙門氏菌hisD基因InDel分子標(biāo)記的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒中含有用于權(quán)利要求3所述檢測(cè)分子標(biāo)記的引物。
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