[發明專利]一種使用Excel精確檢測SOD酶活的方法在審
| 申請號： | 202110902914.7 | 申請日： | 2021-08-06 |
| 公開（公告）號： | CN113624753A | 公開（公告）日： | 2021-11-09 |
| 發明（設計）人： | 于曉軍 | 申請（專利權）人： | 南京百賽生物色譜技術有限公司 |
| 主分類號： | G01N21/78 | 分類號： | G01N21/78;G01N21/31 |
| 代理公司： | 南京源古知識產權代理事務所(普通合伙) 32300 | 代理人： | 鄭宜梅 |
| 地址： | 210000 江蘇*** | 國省代碼： | 江蘇;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 使用 excel 精確 檢測 sod 方法 | ||
1.一種使用Excel精確檢測SOD酶活的方法，其特征在于：包括如下步驟：
步驟一：配制A液：pH值8.2；
0.1mL三羥甲基氨基甲烷(Tris)-鹽酸緩沖溶液（內含1mmol/L EDTA·2Na）；
稱取1.2114 g Tris和37.2mgEDTA·2Na溶于62.4mL0.1moL鹽酸溶液中,用蒸餾水定容至100mL；
步驟二：配制B液：4.5mmoL鄰苯三酚鹽酸溶液；
稱取鄰苯三酚(A.R)56.7mg溶于少量10mmol/L鹽酸溶液,并定容至100mL；
步驟三：鄰苯三酚自氧化速率測定在25℃時,于10mL比色管中依次加入A液2.35mL、蒸餾水2.00mL、B液0.15mL，加入B液立即混合并傾入比色皿中,分別測定在325nm波長條件下初始時和1min后吸光值,二者之差即鄰苯三酚自氧化速率△A325(min-1)；
步驟四：SOD酶液抑制鄰苯三酚自氧化速率測定，按步驟三加入一定量酶液使抑制鄰苯三酚自氧化速率為△A325(min-1)的50%，此時的酶活定義為SOD酶活，計算公式為：
（公式1）
△A325-鄰苯三酚自氧化數率；
△’A325-SOD樣品抑制鄰苯三酚的自氧化速率；
V-所加SOD樣品的體積，單位mL；
D-SOD酶液的稀釋倍數；
4.5-反應液總體積，單位mL；
步驟五：將加入SOD酶液之后每間隔1min的數據記錄入Excel，分別為5組數據，即△'1,△'2, △'3, △'4,△'5。
2.根據權利要求1所述的一種使用Excel精確檢測SOD酶活的方法，其特征在于：將步驟五中的5點的數值在Excel上模擬出對應曲線并計算偏差，當曲線線性擬合度在99%以上時，判斷此時的鄰苯三酚自氧化速率擬制曲線為直線。
3.根據權利要求2所述的一種使用Excel精確檢測SOD酶活的方法，其特征在于：計算直線的斜率K'，當K'/K=50%時，將△'A325的吸光值代入公式1，得出SOD酶活。
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