[發明專利]一種薄層色譜的構建方法和鑒定方法及其應用

在審

• 申請號: 202110901598.1
• 申請日: 2021-08-06
• 公開（公告）號: CN113759067A
• 公開（公告）日: 2021-12-07
• 發明（設計）人: 張志強;董文鳳;李國鵬;王冬月;高揚;付靜
• 申請（專利權）人: 北京康仁堂藥業有限公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90;G01N30/94;G01N30/06
• 代理公司: 北京三聚陽光知識產權代理有限公司 11250
• 代理人: 周衛賽

本發明屬于中藥檢測技術領域，具體提供了一種薄層色譜的構建方法和鑒定方法及其應用，該薄層色譜的構建方法包括如下步驟：貓爪草供試品溶液的制備：取貓爪草供試品、水與無機酸混合，加熱水解，用有機溶劑提取，得到提取液，干燥，溶解，得到供試品溶液；對供試品溶液進行薄層色譜檢測，即得供試品的薄層色譜，使用上述構建方法不僅操作步驟簡便，耗時短，溶劑種類且用量少，節約成本、易于推廣應用；而且供試品溶液中的多種成分很好的分離，使得薄層檢測中斑點分離效果好，清晰，能夠顯出多個斑點，使得鑒別過程更加快速方便、鑒別結果更加準確可靠。

技術領域

本發明屬于中藥檢測技術領域，具體涉及一種薄層色譜的構建方法和鑒定方法及其應用。

背景技術

貓爪草來源為毛莨科植物小毛莨Ranunculus ternatus Thunb.的干燥塊根，具有清熱解毒、軟堅化痰、散結消腫、截瘧等功效。貓爪草主要含有糖類、脂類、氨基酸、黃酮和苷類等成分，具有抗結核菌、抗腫瘤、鎮咳、祛痰、消炎等臨床應用。

目前，貓爪草的藥典質量標準中薄層鑒別主要針對其中的氨基酸成分，但在貓爪草標煎凍干粉中難以檢測，無法定性考察貓爪草成分在藥材、飲片、水提物中的傳遞性；現有技術中，貓爪草也未檢索出對配方顆粒的薄層鑒別方法，因而，無法評價貓爪草從藥材、飲片到貓爪草標準湯劑凍干粉及貓爪草配方顆粒工藝過程是否穩定存在。

例如，楊志芬公開了一種貓爪草的鑒別方法，陳赤等公開了一種野生與野生撫育貓爪草藥材的分析比較方法，上述兩種方法僅能夠對貓爪草藥材進行鑒別，難以實現對貓爪草標準湯劑凍干粉、配方顆粒物質成分的定性鑒別。

因此，亟需建立一種能夠同時應用于貓爪草藥材、飲片、貓爪草標準湯劑凍干粉及貓爪草配方顆粒中貓爪草成分的定性鑒別方法，以作為貓爪草從藥材、飲片到貓爪草標準湯劑凍干粉及貓爪草配方顆粒工藝過程穩定性的定性評價方法之一。

發明內容

因此，本發明的目的在于解決現有技術中的方法無法同時應用于鑒定貓爪草藥材、飲片和貓爪草藥物制劑中貓爪草成分的問題。

為此，本發明提供了一種薄層色譜的構建方法，包括如下步驟：

貓爪草供試品溶液的制備：取貓爪草供試品、水與無機酸混合，加熱水解，用有機溶劑提取，得到提取液，干燥，溶解，得到供試品溶液；

對供試品溶液進行薄層色譜檢測，即得供試品的薄層色譜。

所述薄層色譜檢測包括如下步驟：

(1)取貓爪草供試品溶液在薄層板上點樣；

(2)采用環己烷-乙酸乙酯-甲酸的混合液為展開劑展開，取出，溶劑揮發，顯色，即得。

進一步的，采用的薄層板為硅膠G薄層板；

優選的，薄層板的長度≥10cm，更優選為10-20cm；

優選的，點樣體積為1-30μl；更優選為1-4μl。

進一步的，薄層色譜檢測中，采用紫外下顯色或者硫酸乙醇溶液為顯色劑顯色。具體的，可以采用含體積百分數為10％的硫酸的乙醇溶液。

在某些優選的實施方式中，采用365nm的紫外下顯色。

進一步的，所述貓爪草供試品溶液的制備中，滿足如下a-g中的任意一項或者多項：

a，所述貓爪草供試品的質量與水、無機酸的體積之比為0.3-0.7：20-50：1-3，其中，若質量的單位為g，對應的體積的單位為ml。

b，所述貓爪草供試品的質量與有機溶劑的體積比為0.3-0.7：30-60，其中，若質量的單位為g，對應的體積的單位為ml。

c，加熱水解的溫度為90-100℃，時間為0.5-2h。