[發明專利]一種非變性Ⅱ型膠原蛋白的制備方法

在審

• 申請號: 202110896101.1
• 申請日: 2021-08-05
• 公開（公告）號: CN113480637A
• 公開（公告）日: 2021-10-08
• 發明（設計）人: 潘長沛;李勝;黃時海;李軍霞
• 申請（專利權）人: 廣西南寧佰奧吉生物科技有限公司
• 主分類號: C07K14/78
• 分類號: C07K14/78;C12P21/06;C07K1/34;C07K1/14;C12M1/40;C12M1/02;C12M1/00
• 代理公司: 廣西精誠澤信專利代理事務所(普通合伙) 45138
• 代理人: 吳靜宜

1.一種非變性Ⅱ型膠原蛋白的制備方法，其特征在于：包括以下步驟：

S1、勻漿

將解凍后的雞胸軟骨進行消毒，然后經勻漿處理后得到軟骨粒度為80-200目的漿狀物；

S2、酶解

調節步驟S1中漿狀物的pH值，以使pH＝5-8，然后通過酶解裝置進行第一次酶解，第一次酶解完成后再進行第二次酶解，從而得到酶解液；

S3、過濾

將步驟S2得到的酶解液通過60-100目篩網過濾，得到濾液；

S4、干燥、粉碎

將步驟S3中得到的濾液進行低溫冷凍干燥，然后在4℃以下進行超微粉碎，得到粒度為200-400目的粉劑。

2.根據權利要求1所述的一種非變性Ⅱ型膠原蛋白的制備方法，其特征在于：在步驟S2中，第一次酶解時，先將酶加入到漿狀物中，混勻后再加入木瓜低溫榨汁后過濾獲得的清液，混勻后，酶解10-16h，酶解溫度為25-45℃。

3.根據權利要求2所述的一種非變性Ⅱ型膠原蛋白的制備方法，其特征在于：第二次酶解時，先將酶加入到第一次酶解后的產物中，混勻后再加入木瓜低溫榨汁后過濾獲得的清液，混勻后，酶解10-16h，酶解溫度為25-45℃。

4.根據權利要求3所述的一種非變性Ⅱ型膠原蛋白的制備方法，其特征在于：兩次酶解所用的酶均為胃蛋白酶、堿性蛋白酶、枯草桿菌蛋白酶中的一種或多種；第一次酶解所用的酶與第二次酶解所用的酶類型不同。

5.根據權利要求3所述的一種非變性Ⅱ型膠原蛋白的制備方法，其特征在于：第一次酶解過程中，所述酶的用量為漿狀物重量的0.5％-1％，所述清液用量為漿狀物重量的0.01％-0.05％；第二次酶解過程中，所述酶和所述清液的用量均為第一次酶解過程中所述酶和所述清液的用量的1/2-2/3。

6.根據權利要求1所述的一種非變性Ⅱ型膠原蛋白的制備方法，其特征在于：在步驟S2中，所述酶解裝置包括罐體(1)、夾套(2)、攪拌機構(6)和進料機構(9)，所述罐體(1)頂部設置有進料通道(8)，底部設置有出料口(5)，所述夾套(2)包覆在所述罐體(1)外表面，所述夾套(2)上設置有換熱介質進口(3)和換熱介質出口(4)；

所述攪拌機構(6)安裝在所述罐體(1)上且用于攪拌所述罐體(1)內的物料，所述進料機構(9)位于所述進料通道(8)下方且用于控制所述物料進料。

7.根據權利要求6所述的一種非變性Ⅱ型膠原蛋白的制備方法，其特征在于：所述進料機構(9)包括進料電機(91)、轉軸(92)和進料筒(93)；

所述進料電機(91)安裝在所述罐體(1)上部一側，所述轉軸(92)一端與進料電機(91)輸出軸連接，另一端延伸在所述罐體(1)內且與所述進料筒(93)固定，所述進料筒(93)中心軸與所述轉軸(92)中心軸重合；

所述進料筒(93)位于所述罐體(1)內且處于所述進料通道(8)下方，所述進料通道(8)下端面與所述進料桶圓周表面接觸，所述進料筒(93) 圓周表面開設有進料口(96)，所述進料通道(8)通過所述進料口(96)與所述進料筒(93)連通，所述進料筒(93)圓周表面開設有出料孔(97)。

8.根據權利要求7所述的一種非變性Ⅱ型膠原蛋白的制備方法，其特征在于：所述出料孔(97)設置有多個，多個所述出料孔(97)沿所述進料筒(93)軸向方向均布在所述進料口(96)的相對兩側。

9.根據權利要求7所述的一種非變性Ⅱ型膠原蛋白的制備方法，其特征在于：所述進料筒(93)底部設置有托板(94)，所述托板(94)支撐在所述進料筒(93)底部，所述托板(94)上固定有連接桿(95)，所述連接桿(95)一端與所述托板(94)固定，另一端與所述罐體(1)側壁固定。

10.根據權利要求7所述的一種非變性Ⅱ型膠原蛋白的制備方法，其特征在于：所述進料筒(93)為圓筒狀，或所述進料筒(93)包括中部的圓筒段和位于所述圓筒段兩端的漸變段，所述漸變段內、外徑均向遠離所述圓筒段方向逐漸增大，所述出料孔(97)設置在所述漸變段上，所述出料口(5)設置在所述圓筒段上。