[發明專利]一種N-甲基化多肽的固相合成方法

在審

• 申請號: 202110894992.7
• 申請日: 2021-08-04
• 公開（公告）號: CN114057829A
• 公開（公告）日: 2022-02-18
• 發明（設計）人: 陳志立;譚保鋒;丁俊;張鑫
• 申請（專利權）人: 江蘇金斯瑞生物科技有限公司
• 主分類號: C07K1/34
• 分類號: C07K1/34;C07K1/30;C07K1/16;C07K1/10;C07K1/06;C07K1/04
• 代理公司: 北京華睿卓成知識產權代理事務所(普通合伙) 11436
• 代理人: 程淼

本發明公開了一種N?甲基化多肽的固相合成方法，屬于多肽合成技術領域。本發明具體涉及N?甲基化多肽的固相合成方法，包括在固相合成偶聯上N?甲基氨基酸后，在包含碳二亞胺型偶聯劑的催化下偶聯N?甲基氨基酸的下一位氨基酸。本發明為N?甲基化多肽的制備提供了一條簡捷而實用的技術路線，在多肽合成技術領域具有廣泛的應用。

技術領域

本發明屬于多肽合成領域，特別涉及一種N-甲基化多肽的固相合成方法。

背景技術

N-甲基氨基酸存在于多種天然肽中，其摻入生物活性肽中會改變化學和物理性質，它也可能導致效力增強，新的受體亞型選擇性和激動劑轉化為拮抗劑。含N-甲基化多肽也是潛在的治療藥物，被證明可以改善重要的藥理參數，廣泛應用于抗生素，抗癌劑，抗病毒劑和免疫抑制活性(Biron.E and Kissler.H.Convenient Synthesis of N-Methylamino Acids Compatible with Fmoc Solid-Phase PeptideSynthesis.J.Org.Chem.2005，70，5183-5189)。

然而，N-甲基氨基酸及其衍生物由于空間位阻較大，在進行偶聯時相對比較困難，因此合成N-甲基化多肽具有挑戰性(Ali.F E，Bennett.D B，Calva.R R，etal.Conformationally Constrained Peptides and Semipeptides Derived from RGD asPotent Inhibitors of the Platelet Fibrinogen Receptor and PlateletAggregation.J.Med.Chem.1994，37，769-780)。

1999年，Akaji小組開發的2-氯-1，3-二甲基-2-甲基咪唑啉六氟磷酸鹽(CIP)作為有效的偶聯劑成功進行了含N-甲基片段2和吡咯烷酮片段3的合成，最終合成了從印度洋海兔中分離出的一種具有細胞生長抑制作用的去肽dolastatin 15(Akaji.K，Hayashi.Y，Kiso.Y.Convergent Synthesis of Dolastatin 15 by Solid Phase Coupling of an N-Methylamino Acid.J.Org.Chem.1999，64，405-411)。

2005年，Teixido′小組研究發現PyAop/PyBop與HOAT是偶聯N-甲基氨基酸的良好縮合體系(Teixido′.M，Albericio.F and Giralt E.Solid-phase synthesis andcharacterization of N-methyl-rich peptides.J.Peptide Res.，2005，65，153-166.)。

2015年，Adamska小組報道的基于三嗪的偶聯劑4-(4，6-二甲氧基-1，3，5-三嗪-2-基)-4-甲基嗎啉甲苯-4-磺酸鹽能夠用于合成N-甲基化多肽，與標準偶聯劑(如TBTU或HATU)相比，收率低，副產物量少(Adamska.A，B，Kluczyk.A et al.Synthesis oflinear and cyclic opioid-based peptide analogs containing multiple N-methylated amino acid residues.J.Pept.Sci.2015，21，807-810)。

然而這些方法的共同缺點是在進行偶聯反應的同時易發生消旋化或生成二酮哌嗪等副產物，最終導致收率低，后處理復雜，偶聯試劑價格也比較昂貴。

發明內容

本發明公開了一種N-甲基化多肽的合成方法，屬于多肽合成技術領域。這種化合物是一類重要的合成中間體，本身還具有廣泛的生物活性。在廉價易得的碳二亞胺型偶聯試劑催化下，發生酰胺偶聯反應，得到一系列高產率、高純度N-甲基化多肽。本發明為N-甲基化多肽的制備提供了一條簡捷而實用的技術路線，在多肽合成技術領域具有廣泛的應用。