[發明專利]一種檢測豬紅細胞免疫粘附功能的循環檢測系統及方法

有效

• 申請號: 202110892012.X
• 申請日: 2021-08-04
• 公開（公告）號: CN113533134B
• 公開（公告）日: 2022-11-15
• 發明（設計）人: 尹偉;侯震;范闊海;孫娜;孫盼盼;孫耀貴;李宏全
• 申請（專利權）人: 山西農業大學
• 主分類號: G01N11/06
• 分類號: G01N11/06;G01N21/64
• 代理公司: 北京鑫瑞森知識產權代理有限公司 11961
• 代理人: 韓鳳穎

本發明公開了一種檢測豬紅細胞免疫粘附功能的循環檢測系統及方法，該系統包括：流動小室、墊圈、流動相儲液瓶、蠕動泵、硅膠軟管以及設置有載玻片的細胞培養皿，所述墊圈墊于所述載玻片邊緣上，所述流動小室蓋于墊圈上；再以硅膠軟管將流動小室、流動相儲液瓶、蠕動泵依次相連，構成循環檢測系統；所述流動相儲液瓶內注入免疫粘附致敏GFP?E.coli的豬紅細胞懸液。本發明提供的檢測豬紅細胞免疫粘附功能的循環檢測系統及方法，構建了一套循環檢測體系，可用于流動相流速、剪切力以及最大保持時間等工作參數的檢測和分析。

技術領域

本發明涉及豬紅細胞免疫粘附功能檢測技術領域，特別是涉及一種檢測豬紅細胞免疫粘附功能的循環檢測系統及方法。

背景技術

人和多種動物的紅細胞與白細胞一樣，具有重要的免疫功能，其基礎是紅細胞表面具有C3b受體，紅細胞可通過表面的C3b受體發揮清除免疫復合物、促進吞噬、提呈抗原及激活補體等多種作用，因此，建立檢測紅細胞免疫功能的方法成為本領域的關鍵技術。目前，在豬紅細胞免疫粘附功能檢測方面還缺乏一套系統的檢測體系及工作參數的建立方法，亟需相關技術人員進行探索。

發明內容

本發明的目的是提供一種檢測豬紅細胞免疫粘附功能的循環檢測系統及方法，構建了一套循環檢測體系，可用于流動相流速、剪切力以及最大保持時間等工作參數的檢測和分析。

為實現上述目的，本發明提供了如下方案：

一種檢測豬紅細胞免疫粘附功能的循環檢測系統，包括流動小室、墊圈、流動相儲液瓶、蠕動泵、硅膠軟管以及設置有載玻片的細胞培養皿，所述墊圈墊于所述載玻片邊緣上，所述流動小室蓋于墊圈上；再以硅膠軟管將流動小室、流動相儲液瓶、蠕動泵依次相連，構成循環檢測系統；所述流動相儲液瓶內注入免疫粘附致敏GFP-E.coli的豬紅細胞懸液。

進一步的，所述免疫粘附致敏GFP-E.coli的豬紅細胞懸液的注入量為20mL。

本發明還提供了一種檢測豬紅細胞免疫粘附功能的循環檢測方法，應用于上述的檢測豬紅細胞免疫粘附功能的循環檢測系統，包括以下步驟：

S1，啟動蠕動泵，使流動相儲液瓶中的豬紅細胞懸液流動并充滿整個循環檢測系統；

S2，設定蠕動泵轉速，記錄一段時間內各轉速下采用收集管收集到的懸液的體積；

S3，計算豬紅細胞懸液在循環檢測系統內的流動速度，重復檢測n次，n≥3；

S4，計算循環檢測系統中各轉速下豬紅細胞懸液流動的剪切力。

進一步的，所述步驟S3中，計算豬紅細胞懸液在循環檢測系統內的流動速度，采用如下公式：

其中，Q表示流動速度，單位為mL/s；V_n表示一段時間內各轉速下收集到的懸液的體積，V₀表示初始體積。

進一步的，所述步驟S4中，計算循環檢測系統中各轉速下豬紅細胞懸液流動的剪切力，采用如下公式：

其中，τ為剪切力，單位為dynes/cm²；μ為介質粘度，為0.0076P；a為流動小室通道高度，為0.013cm；b為通道寬度為1.0cm；Q表示流動速度，單位為mL/s。

進一步的，所述一段時間設定為120s。

進一步的，所述方法還包括確定流動相最大保持時間，具體包括：

在豬紅細胞懸液流動并充滿整個循環檢測系統后，設定蠕動泵轉速；