[發(fā)明專利]一種檢測(cè)豬紅細(xì)胞免疫粘附功能的循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)及方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110892012.X
• 申請(qǐng)日: 2021-08-04
• 公開（公告）號(hào): CN113533134B
• 公開（公告）日: 2022-11-15
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 尹偉;侯震;范闊海;孫娜;孫盼盼;孫耀貴;李宏全
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山西農(nóng)業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N11/06
• 分類號(hào): G01N11/06;G01N21/64
• 代理公司: 北京鑫瑞森知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11961
• 代理人: 韓鳳穎

1.一種檢測(cè)豬紅細(xì)胞免疫粘附功能的循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)，其特征在于，包括：流動(dòng)小室、墊圈、流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶、蠕動(dòng)泵、硅膠軟管以及設(shè)置有載玻片的細(xì)胞培養(yǎng)皿，所述墊圈墊于所述載玻片邊緣上，所述流動(dòng)小室蓋于墊圈上；再以硅膠軟管將流動(dòng)小室、流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶、蠕動(dòng)泵依次相連，構(gòu)成循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)；所述流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶?jī)?nèi)注入免疫粘附致敏GFP-E.coli的豬紅細(xì)胞懸液；

一種應(yīng)用于所述檢測(cè)豬紅細(xì)胞免疫粘附功能的循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)的循環(huán)檢測(cè)方法，包括以下步驟：

S1，啟動(dòng)蠕動(dòng)泵，使流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶中的豬紅細(xì)胞懸液流動(dòng)并充滿整個(gè)循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)；

S2，設(shè)定蠕動(dòng)泵轉(zhuǎn)速，記錄一段時(shí)間內(nèi)各轉(zhuǎn)速下采用收集管收集到的懸液的體積；

S3，計(jì)算豬紅細(xì)胞懸液在循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)內(nèi)的流動(dòng)速度，重復(fù)檢測(cè)n次，n≥3；

S4，計(jì)算循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)中各轉(zhuǎn)速下豬紅細(xì)胞懸液流動(dòng)的剪切力；

所述循環(huán)檢測(cè)方法還包括確定流動(dòng)相最大保持時(shí)間，具體包括：

在豬紅細(xì)胞懸液流動(dòng)并充滿整個(gè)循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)后，設(shè)定蠕動(dòng)泵轉(zhuǎn)速；

每隔一段時(shí)間，從流動(dòng)相儲(chǔ)液瓶中吸取0.2mL豬紅細(xì)胞懸液樣品，以流式細(xì)胞儀檢測(cè)各時(shí)間點(diǎn)豬紅細(xì)胞表面熒光強(qiáng)度，設(shè)置每管檢測(cè)的豬紅細(xì)胞數(shù)為10⁵，每時(shí)間點(diǎn)的樣品檢測(cè)3次，計(jì)算各時(shí)間點(diǎn)平均熒光強(qiáng)度；

以單因素方差分析法，計(jì)算不同時(shí)間點(diǎn)的熒光強(qiáng)度之間差異。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)豬紅細(xì)胞免疫粘附功能的循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)，其特征在于，所述免疫粘附致敏GFP-E.coli的豬紅細(xì)胞懸液的注入量為20mL。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)豬紅細(xì)胞免疫粘附功能的循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)，其特征在于，所述步驟S3中，計(jì)算豬紅細(xì)胞懸液在循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)內(nèi)的流動(dòng)速度，采用如下公式：

其中，Q表示流動(dòng)速度，單位為mL/s；V_n表示一段時(shí)間內(nèi)各轉(zhuǎn)速下收集到的懸液的體積，V₀表示初始體積。

4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的檢測(cè)豬紅細(xì)胞免疫粘附功能的循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)，其特征在于，所述步驟S4中，計(jì)算循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)中各轉(zhuǎn)速下豬紅細(xì)胞懸液流動(dòng)的剪切力，采用如下公式：

其中，τ為剪切力，單位為dynes/cm²；μ為介質(zhì)粘度，為0.0076P；a為流動(dòng)小室通道高度，為0.013cm；b為通道寬度為1.0cm；Q表示流動(dòng)速度，單位為mL/s。

5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的檢測(cè)豬紅細(xì)胞免疫粘附功能的循環(huán)檢測(cè)系統(tǒng)，其特征在于，所述一段時(shí)間設(shè)定為120s。