[發(fā)明專利]基于淋巴細胞的同源靶向性人工抗原呈遞細胞及其構(gòu)建和應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 202110891900.X
• 申請日: 2021-08-04
• 公開（公告）號: CN113528436B
• 公開（公告）日: 2023-01-17
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 劉莊;孫樂樂
• 申請（專利權(quán)）人: 蘇州大學
• 主分類號: C12N5/0781
• 分類號: C12N5/0781;C12N5/0783;C12N5/00;A61K39/00;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 蘇州市中南偉業(yè)知識產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32257
• 代理人: 王玉仙

1.一種基于淋巴細胞的同源靶向性人工抗原呈遞細胞，其特征在于，所述基于淋巴細胞的同源靶向性人工抗原呈遞細胞以淋巴細胞為載體，還包括偶聯(lián)在所述淋巴細胞表面的復(fù)合物和共刺激分子，其中，所述復(fù)合物由腫瘤抗原肽和主要組織相容性復(fù)合體I形成；

所述淋巴細胞的表面分別修飾有單鏈DNA1和單鏈DNA2，其中，所述單鏈DNA1由脂質(zhì)和生物素雙修飾且連接一個與其完全互補的單鏈cDNA1，所述單鏈DNA2由脂質(zhì)修飾且連接一個與其完全互補的單鏈cDNA2，單鏈cDNA2由生物素修飾，所述復(fù)合物由生物素修飾，所述共刺激分子由生物素修飾；

所述單鏈DNA1與所述復(fù)合物通過親和素特異性結(jié)合；

所述單鏈cDNA2與所述共刺激分子通過親和素特異性結(jié)合。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人工抗原呈遞細胞，其特征在于：所述淋巴細胞來源于自身外周血。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人工抗原呈遞細胞，其特征在于：所述共刺激分子選自CD28抗體、CD40抗體、OX40抗體、CD27抗體、CD137抗體和GITR抗體中的一種或幾種。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的人工抗原呈遞細胞，其特征在于：所述腫瘤抗原肽選自腫瘤相關(guān)的抗原的肽、自身抗原的肽、同種異型抗原的肽和傳染劑抗原的肽中的一種或幾種。

5.一種權(quán)利要求1-4任一項所述的基于淋巴細胞的同源靶向性人工抗原呈遞細胞在制備腫瘤免疫治療藥物中的應(yīng)用。

6.一種腫瘤治療制劑，其特征在于：所述腫瘤治療制劑包括權(quán)利要求1-4任一項所述的基于淋巴細胞的同源靶向性人工抗原呈遞細胞。

7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的腫瘤治療制劑，其特征在于：所述腫瘤治療制劑還包括PD1抗體。

8.權(quán)利要求1所述的人工抗原呈遞細胞的構(gòu)建方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將主要組織相容性復(fù)合體I與生物素在緩沖液中反應(yīng)，得到生物素修飾的主要組織相容性復(fù)合體I，將其與腫瘤抗原肽孵育結(jié)合，得到由腫瘤抗原肽和主要組織相容性復(fù)合體I形成的復(fù)合物；

將共刺激分子與生物素在緩沖液中反應(yīng)，得到生物素修飾的共刺激分子，將其與親和素孵育結(jié)合，得到親和素修飾的共刺激分子，將其與生物素修飾的單鏈cDNA2孵育結(jié)合，得到cDNA2修飾的共刺激分子；

將淋巴細胞與脂質(zhì)和生物素雙修飾的單鏈DNA1、cDNA1在緩沖液中孵育結(jié)合，得到DNA修飾的淋巴細胞，將DNA修飾的淋巴細胞與親和素在緩沖液中孵育結(jié)合，得到親和素修飾的淋巴細胞；

（2）將所述親和素修飾的淋巴細胞、所述由腫瘤抗原肽和主要組織相容性復(fù)合體I形成的復(fù)合物、脂質(zhì)修飾的單鏈DNA2在緩沖液中孵育結(jié)合，得到復(fù)合物和DNA2雙修飾的淋巴細胞；

（3）將所述復(fù)合物和DNA2雙修飾的淋巴細胞與所述cDNA2修飾的共刺激分子在緩沖液中孵育結(jié)合，得到所述基于淋巴細胞的同源靶向性人工抗原呈遞細胞。