[發(fā)明專利]基于淋巴細(xì)胞的同源靶向性人工抗原呈遞細(xì)胞及其構(gòu)建和應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110891900.X
• 申請(qǐng)日: 2021-08-04
• 公開（公告）號(hào): CN113528436B
• 公開（公告）日: 2023-01-17
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 劉莊;孫樂(lè)樂(lè)
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 蘇州大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N5/0781
• 分類號(hào): C12N5/0781;C12N5/0783;C12N5/00;A61K39/00;A61K39/395;A61P35/00
• 代理公司: 蘇州市中南偉業(yè)知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 32257
• 代理人: 王玉仙

本發(fā)明涉及一種基于淋巴細(xì)胞的同源靶向性人工抗原呈遞細(xì)胞，其以淋巴細(xì)胞為載體，還包括偶聯(lián)在淋巴細(xì)胞表面的由腫瘤抗原肽和主要組織相容性復(fù)合體I形成的復(fù)合物、共刺激分子。本發(fā)明的基于淋巴細(xì)胞的同源靶向性人工抗原呈遞細(xì)胞能夠在體內(nèi)特異性遷移到外周淋巴器官，從而激活機(jī)體自身的抗原特異性CD8陽(yáng)性T細(xì)胞，在制備腫瘤免疫治療藥物方面具有潛在的應(yīng)用前景。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及免疫治療技術(shù)領(lǐng)域，尤其涉及一種基于淋巴細(xì)胞的同源靶向性人工抗原呈遞細(xì)胞及其構(gòu)建和應(yīng)用。

背景技術(shù)

腫瘤是威脅人類生存的一種惡性疾病。隨著世界人口的老齡化以及生活環(huán)境和生活習(xí)慣的變化，因腫瘤死亡的人數(shù)每年都在急劇增加。目前，化療和放療是臨床上除手術(shù)切外進(jìn)行腫瘤治療的主要方法，但是其具有很強(qiáng)的毒副作用。癌癥免疫治療是近年來(lái)的研究熱點(diǎn)。抗原特異性CD8陽(yáng)性T細(xì)胞活化在腫瘤免疫治療中起重要作用。在此過(guò)程中，抗原呈遞細(xì)胞(APC)通過(guò)I類主要組織相容性復(fù)合體(MHC-I)向T細(xì)胞呈遞腫瘤特異性抗原是關(guān)鍵步驟。之前的研究表明，由樹突狀細(xì)胞(DC)等專職APC攝取的腫瘤抗原需要通過(guò)交叉呈遞，才能以抗原肽-I類主要組織相容性復(fù)合體(pMHC-I)的形式呈遞到細(xì)胞表面。然而，自發(fā)抗原交叉呈遞的效率是有限的，因此，已開發(fā)出DC細(xì)胞疫苗來(lái)激活患者體內(nèi)腫瘤抗原特異性CD8陽(yáng)性T細(xì)胞。DC細(xì)胞疫苗的制備，首先通過(guò)誘導(dǎo)自體干細(xì)胞分化獲得DC細(xì)胞，然后通過(guò)人工干預(yù)增強(qiáng)體外腫瘤特異性抗原的交叉呈遞。這是一個(gè)昂貴且勞動(dòng)密集型的過(guò)程，且此類DC疫苗通過(guò)人工誘導(dǎo)交叉呈遞，很難確保產(chǎn)品批次的穩(wěn)定性。

人工抗原呈遞細(xì)胞(aAPC)是天然APC的模擬物，用于體外T細(xì)胞擴(kuò)增，在過(guò)繼免疫療法中發(fā)揮重要作用。aAPCs是通過(guò)化學(xué)手段將T細(xì)胞激活配體，包括pMHC(T細(xì)胞受體激活配體)和共刺激分子，修飾到生物相容性材料表面的來(lái)構(gòu)建的。然而，之前報(bào)道的大多數(shù)aAPCs都是用人工合成的納米或微米級(jí)顆粒作為基質(zhì)材料構(gòu)建的，這些aAPCs上的配體分布與天然APCs上的配體分布有很大不同。Zhuang Liu等(DNA-Edited Ligand Positioningon Red Blood Cells to Enable Optimized T Cell Activation for Adoptive Immunotherapy.Angew.Chem.Int.Ed.2020,59,14842–14853.)使用脂質(zhì)功能化DNA誘導(dǎo)的自組裝技術(shù)，利用紅細(xì)胞(RBC)構(gòu)建了aAPC。然而，這些aAPCs都不能特異性遷移到有利于T細(xì)胞增殖的外周淋巴組織中的T細(xì)胞富集區(qū)域，因此無(wú)法在活體內(nèi)實(shí)現(xiàn)最佳的自體抗原特異性T細(xì)胞活化效果。

發(fā)明內(nèi)容

為解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了一種基于淋巴細(xì)胞的同源靶向性人工抗原呈遞細(xì)胞，能夠在體內(nèi)特異性遷移到外周淋巴器官，從而激活機(jī)體自身的抗原特異性CD8陽(yáng)性T細(xì)胞，進(jìn)而殺傷腫瘤細(xì)胞，抑制腫瘤生長(zhǎng)，延長(zhǎng)生存期。

本發(fā)明的一種基于淋巴細(xì)胞的同源靶向性人工抗原呈遞細(xì)胞，以淋巴細(xì)胞為載體，還包括偶聯(lián)在淋巴細(xì)胞表面的復(fù)合物和共刺激分子，其中，復(fù)合物由腫瘤抗原肽和主要組織相容性復(fù)合體I形成。

傳統(tǒng)的基于合成材料的aAPC和基于RBC的aAPC都不能特異性遷移到外周淋巴組織中的T細(xì)胞富集區(qū)域，這些區(qū)域是T細(xì)胞擴(kuò)增的有利位置。本發(fā)明以淋巴細(xì)胞為載體構(gòu)建的人工抗原呈遞細(xì)胞，可以通過(guò)淋巴細(xì)胞表面的歸巢受體靶向遷移到外周淋巴器官，包括脾臟和淋巴結(jié)，從而與外周淋巴器官中的T細(xì)胞發(fā)生緊密接觸，進(jìn)而有效激活機(jī)體自身的抗原特異性CD8陽(yáng)性T細(xì)胞。

進(jìn)一步地，基于淋巴細(xì)胞的同源靶向性人工抗原呈遞細(xì)胞中，淋巴細(xì)胞與復(fù)合物通過(guò)雙鏈DNA連接，其中，淋巴細(xì)胞與雙鏈DNA通過(guò)脂質(zhì)連接，復(fù)合物與雙鏈DNA通過(guò)非共價(jià)作用結(jié)合；

淋巴細(xì)胞與共刺激分子通過(guò)完全互補(bǔ)的雙鏈DNA連接，其中，淋巴細(xì)胞與雙鏈DNA的一條鏈通過(guò)脂質(zhì)連接，共刺激分子與雙鏈DNA的另一條鏈連接。