[發(fā)明專利]消除大腸桿菌藥物耐藥性的中藥組方及其篩選方法與應(yīng)用在審
| 申請(qǐng)?zhí)枺?/td> | 202110887766.6 | 申請(qǐng)日： | 2021-08-03 |
| 公開（公告）號(hào)： | CN113604535A | 公開（公告）日： | 2021-11-05 |
| 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人： | 張永英;鐘翠紅;王芝超;石玉祥;郝賀;曠年玲;左麗 | 申請(qǐng)（專利權(quán)）人： | 河北工程大學(xué) |
| 主分類號(hào)： | C12Q1/18 | 分類號(hào)： | C12Q1/18;C12Q1/6851;G01N27/447;A61K36/734;A61K36/718;A61P31/04;A61K31/546 |
| 代理公司： | 北京集智東方知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理有限公司 11578 | 代理人： | 吳倩 |
| 地址： | 056038 河北*** | 國省代碼： | 河北;13 |
| 權(quán)利要求書： | 查看更多 | 說明書： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索關(guān)鍵詞： | 消除 大腸桿菌 藥物 耐藥性 中藥 及其 篩選 方法 應(yīng)用 | ||
1.一種消除大腸桿菌藥物耐藥性的中藥組方篩選方法，其特征在于：包括以下步驟：
A、根據(jù)消除大腸桿菌耐藥機(jī)制篩選單味中藥，所述耐藥機(jī)制主要包括R質(zhì)粒介導(dǎo)、產(chǎn)生ESBLs、通過主動(dòng)外排系統(tǒng)和形成生物膜；
B、采用凝膠電泳方法篩選消除R質(zhì)粒的單味中藥；
C、利用雙紙片法篩選抑制ESBLs活性的單味中藥；
D、利用熒光定量PCR方法篩選降低外排系統(tǒng)基因Acra-mRNA、Acrb-mRNA表達(dá)量的單味中藥；
E、利用生物膜陽性篩選方法，篩選出降低生物膜黏附性的單味中藥；
F、將步驟B-E中篩選出的單味中藥組成中藥組合物。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述一種消除大腸桿菌藥物耐藥性的中藥組方篩選方法，其特征在于：所述篩選方法還包括：
A-1、中藥水提物制備：將單味中藥浸泡30min，文火熬制2次，合并濃縮、過濾除菌，濃度為1g/mL以生藥計(jì)，得到單味中藥水提物；
A-2、大腸桿菌菌液制備：將冷凍保存菌液接種于LB液體培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)過夜，將活化菌液劃線接種于麥康凱瓊脂平板，37℃倒置培養(yǎng)過夜，挑取單菌落接種于LB液體培養(yǎng)基中，37℃培養(yǎng)過夜，得到大腸桿菌菌液。
3.一種消除大腸桿菌藥物耐藥性的中藥組方，其特征在于：所述中藥組合物為山楂1份和黃連1份，所述中藥組合物與抗生素聯(lián)合使用，所述抗生素為頭孢噻肟，所述抗生素與中藥組合物的重量份數(shù)比為(2～5)：10。
4.一種中藥組方的應(yīng)用，其特征在于：所述中藥組方用于消除雞源大腸桿菌β-內(nèi)酰胺類藥物耐藥性。
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