[發明專利]基于表型與SSR分子標記聯合構建普通菜豆的指紋圖譜

有效

• 申請號: 202110879961.4
• 申請日: 2021-08-02
• 公開（公告）號: CN113373259B
• 公開（公告）日: 2022-04-05
• 發明（設計）人: 杜吉到;杜艷麗;趙強;張琦;夏春陽;李明;任心雨;王廣達;張兆寧
• 申請（專利權）人: 黑龍江八一農墾大學
• 主分類號: C12Q1/6895
• 分類號: C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京東方盛凡知識產權代理事務所(普通合伙) 11562
• 代理人: 程小芳

本發明公開了一種基于表型與SSR分子標記聯合構建普通菜豆的指紋圖譜，屬于植物品種鑒別技術領域。本發明公開一種用于鑒別菜豆的分子標記組合，其通過SEQ ID NO：1?SEQ ID NO：42所示引物擴增得到。還公開了如SEQ ID NO：1?SEQ ID NO：42所示的引物組合、包括引物組合或者分子標記組合的試劑盒以及普通菜豆的指紋圖譜的構建方法，通過構建的表型指紋圖譜和DNA指紋圖譜聯合構建成普通菜豆的指紋圖譜，該指紋圖譜可以100％準確鑒定不同品種的普通菜豆，檢測效果好且節約時間、成本等優點，可為普通菜豆品種DNA指紋鑒定提供技術支持。

技術領域

本發明涉及植物品種鑒別領域，特別是涉及一種基于表型與SSR分子標記聯合構建普通菜豆的指紋圖譜。

背景技術

普通菜豆屬豆科普通菜豆屬作物，普通菜豆適宜在溫帶和熱帶高海拔地區種植，比較耐冷喜光。普通菜豆屬短日照植物，但多數品種對日照長短的要求不嚴格，栽培季節主要受溫度的制約。中國的西北和東北地區在春夏栽培；直播或育苗移栽均可。同時，普通菜豆營養豐富，含有豐富的蛋白質、脂肪、碳水化合物、膳食纖維、維生素A、蘿卜素、硫胺素、核黃素、尼克酸、維生素C、維生素E、鈣、磷、鈉等成分。多年來，品種鑒定是以形態學標記為依據的。這種方法雖然簡單經濟，但周期長，花費大，受季節限制，而且很多性狀的表現受栽培措施及環境因子影響，從而制約了鑒定的準確性。DNA分子標記技術則具有高效、準確、不受環境條件影響、實驗操作簡單等優點，已廣泛應用于植物品種真實性鑒定及純度檢測研究。SSR標記是近年來發展起來的建立在PCR基礎上的第二代分子標記。由于SSR分子標記具有數量豐富、多態性高、遺傳共顯性、譜帶擴增穩定、精度高、檢測時間短、技術成熟等特點，已應用于作物遺傳學研究。目前，菜豆中也有利用分子標記技術進行研究的，但是沒有具體只針對普通菜豆品種開發的SSR分子標記以及利用SSR分子標記構建的技術體系。

發明內容

本發明的目的是提供一種基于表型與SSR分子標記聯合構建普通菜豆的指紋圖譜，以解決上述現有技術存在的問題，能夠準確鑒別不同品種的普通菜豆。

為實現上述目的，本發明提供了如下方案：

本發明提供一種用于鑒別菜豆的分子標記組合，所述分子標記包括PvSSR-01-1、PvSSR-02-1、PvSSR-02-2、PvSSR-03-1、PvSSR-03-2、PvSSR-04-1、PvSSR-04-2、PvSSR-05-1、PvSSR-05-2、PvSSR-06-1、PvSSR-06-2、PvSSR-07-1、PvSSR-07-2、PvSSR-08-1、PvSSR-08-2、PvSSR-09-1、PvSSR-09-2、PvSSR-10-1、PvSSR-10-2、PvSSR-11-1、PvSSR-11-2，所述分子標記分別通過如下引物對擴增得到：SEQ ID NO：1-2、SEQ ID NO：3-4、SEQ ID NO：5-6、SEQ IDNO：7-8、SEQ ID NO：9-10、SEQ ID NO：11-12、SEQ ID NO：13-14、SEQ ID NO：15-16、SEQ IDNO：17-18、SEQ ID NO：19-20、SEQ ID NO：21-22、SEQ ID NO：23-24、SEQ ID NO：25-26、SEQID NO：27-28、SEQ ID NO：29-30、SEQ ID NO：31-32、SEQ ID NO：33-34、SEQ ID NO：35-36、SEQ ID NO：37-38、SEQ ID NO：39-40、SEQ ID NO：41-42所示引物。

本發明還提供一種引物組合，包括21對特異性引物對，其核苷酸序列分別如SEQID NO：1-SEQ ID NO：42所示。

本發明還提供一種試劑盒，包含所述的分子標記組合或者所示的引物組合。

本發明還提供一種普通菜豆指紋圖譜的構建方法，包括構建表型指紋圖譜和DNA指紋圖譜：