[發(fā)明專利]基于表型與SSR分子標(biāo)記聯(lián)合構(gòu)建普通菜豆的指紋圖譜

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110879961.4
• 申請(qǐng)日: 2021-08-02
• 公開（公告）號(hào): CN113373259B
• 公開（公告）日: 2022-04-05
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 杜吉到;杜艷麗;趙強(qiáng);張琦;夏春陽;李明;任心雨;王廣達(dá);張兆寧
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 黑龍江八一農(nóng)墾大學(xué)
• 主分類號(hào): C12Q1/6895
• 分類號(hào): C12Q1/6895;C12N15/11
• 代理公司: 北京東方盛凡知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙) 11562
• 代理人: 程小芳

1.一種用于鑒別菜豆的分子標(biāo)記組合，其特征在于，所述分子標(biāo)記包括PvSSR-01-1、PvSSR-02-1、PvSSR-02-2、PvSSR-03-1、PvSSR-03-2、PvSSR-04-1、PvSSR-04-2、PvSSR-05-1、PvSSR-05-2、PvSSR-06-1、PvSSR-06-2、PvSSR-07-1、PvSSR-07-2、PvSSR-08-1、PvSSR-08-2、PvSSR-09-1、PvSSR-09-2、PvSSR-10-1、PvSSR-10-2、PvSSR-11-1、PvSSR-11-2，所述分子標(biāo)記分別通過如下引物對(duì)擴(kuò)增得到：SEQ ID NO：1-2、SEQ ID NO：3-4、SEQ ID NO：5-6、SEQ IDNO：7-8、SEQ ID NO：9-10、SEQ ID NO：11-12、SEQ ID NO：13-14、SEQ ID NO：15-16、SEQ IDNO：17-18、SEQ ID NO：19-20、SEQ ID NO：21-22、SEQ ID NO：23-24、SEQ ID NO：25-26、SEQID NO：27-28、SEQ ID NO：29-30、SEQ ID NO：31-32、SEQ ID NO：33-34、SEQ ID NO：35-36、SEQ ID NO：37-38、SEQ ID NO：39-40、SEQ ID NO：41-42所示引物。

2.一種引物組合，其特征在于，包括21對(duì)特異性引物對(duì)，其核苷酸序列分別如SEQ IDNO：1-SEQ ID NO：42所示。

3.一種試劑盒，其特征在于，包含權(quán)利要求1所述的分子標(biāo)記組合或者權(quán)利要求2所示的引物組合。

4.一種普通菜豆指紋圖譜的構(gòu)建方法，其特征在于，包括構(gòu)建表型指紋圖譜和DNA指紋圖譜：

不同普通菜豆的花色，生長習(xí)性，結(jié)莢習(xí)性，莢色，莢面，種皮斑紋，種皮斑紋色，粒形性狀被采集并進(jìn)行編號(hào)，構(gòu)建表型指紋圖譜；

利用權(quán)利要求2所述的引物組合對(duì)不同品種普通菜豆的DNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增，再對(duì)擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳檢測，根據(jù)電泳檢測結(jié)果構(gòu)建DNA指紋圖譜；

所述表型指紋圖譜和DNA指紋圖譜組合構(gòu)建成普通菜豆的指紋圖譜；

所述普通菜豆品種為資源庫號(hào)為YD001的紅腰飯豆、資源庫號(hào)為YD002的YD33、資源庫號(hào)為YD003的黑豆Y124、資源庫號(hào)為YD005的普通菜豆Y137、資源庫號(hào)為YD006的日本白普通菜豆、資源庫號(hào)為YD007的黑普通菜豆Y92、資源庫號(hào)為YD008的黑普通菜豆Y120、資源庫號(hào)為YD009的紅普通菜豆F3389、資源庫號(hào)為YD010的奶圓粒、資源庫號(hào)為YD011的英國紅、資源庫號(hào)為YD012的菜豆12、資源庫號(hào)為YD013的點(diǎn)滴褐13、資源庫號(hào)為YD016的黑普通菜豆、資源庫號(hào)為YD017的蒙古圓、資源庫號(hào)為YD018的英國紅普通菜豆Y84、資源庫號(hào)為YD019的77、資源庫號(hào)為YD020的Y10Y14、資源庫號(hào)為YD022的英國紅普通菜豆Y84-1、資源庫號(hào)為YD023的普通菜豆Y80、資源庫號(hào)為YD024的黑豆Y135、資源庫號(hào)為YD025的紫花普通菜豆、資源庫號(hào)為YD026的黑普通菜豆03、資源庫號(hào)為YD027的Y09、資源庫號(hào)為YD028的敘利亞奶花Y91、資源庫號(hào)為YD029的英國紅普通菜豆、資源庫號(hào)為YD031的點(diǎn)滴褐31、資源庫號(hào)為YD032的英國紅普通菜豆Y84-2、資源庫號(hào)為YD033的紅菜豆33、資源庫號(hào)為YD034的普通菜豆Y137和資源庫號(hào)為YD035的普通菜豆Y80；所述普通菜豆品種名稱及資源庫號(hào)均來自國家雜糧工程技術(shù)研究中心種質(zhì)資源庫；

根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)DNA分子量和引物的遷移率記錄電泳結(jié)果，每對(duì)引物遷移率最大的條帶記為1，遷移率次之的記為2，依次類推，無條帶記為0，建立SSR基因型信息數(shù)據(jù)，按照引物順序進(jìn)行編碼，得到的指紋代碼即為該品種的特征指紋圖譜。