[發明專利]一種鑒定性連鎖矮小基因的引物組及其應用

在審

• 申請號: 202110870820.6
• 申請日: 2021-07-30
• 公開（公告）號: CN113430277A
• 公開（公告）日: 2021-09-24
• 發明（設計）人: 孫從佼;徐桂云;王喜瓊;莊景杰
• 申請（專利權）人: 中國農業大學
• 主分類號: C12Q1/6888
• 分類號: C12Q1/6888;C12Q1/6858;C12N15/11
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 11385
• 代理人: 戴嵩瑋

1.一種鑒定性連鎖矮小基因的引物組，其特征在于，包括引物對1和引物對2；

所述引物對1的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：1所示；所述引物對1的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示；

所述引物對2的正向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：2所示；所述引物對2的反向引物的核苷酸序列如SEQ ID NO：3所示。

2.權利要求1所述引物組在鑒定性連鎖矮小基因攜帶雞中的應用。

3.一種鑒定性連鎖矮小基因攜帶雞的試劑或試劑盒，其特征在于，所述試劑或試劑盒包括權利要求1所述的引物組。

4.一種鑒定性連鎖矮小基因攜帶雞的方法，其特征在于，包括以下步驟：

以樣本雞的基因組DNA或總RNA反轉錄得到的cDNA為模板，利用權利要求1所述引物組進行PCR擴增，得到擴增產物；

擴增產物的判斷包括：當含有600bp～700bp的擴增產物時，則樣本雞為性連鎖矮小基因的攜帶者。

5.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述PCR反應程序包括：94℃預變性5min；94℃變性30s，58℃復性30s，72℃延伸40s，循環35次；72℃延伸5min。

6.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述PCR擴增的反應體系以20μL計，包括：PCR SuperMix 10μL，所述引物組中引物對1的正向引物和引物對2的正向引物各0.4μL，所述引物組中引物對1的反向引物和引物對2的反向引物各0.2μL，DNA模板2.5μL和剩余去離子水。

7.根據權利要求6所述的方法，其特征在于，所述PCR SuperMix的濃度為10μmoL/L；所述引物組中引物對1的正向引物、引物對1的反向引物、引物對2的正向引物和引物對2的反向引物的工作濃度均為10μmoL/L；所述DNA模板的濃度為100ng/μL。

8.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，所述判斷的方法包括電泳或測序。

9.根據權利要求4所述的方法，其特征在于，擴增產物的判斷還包括：當含有600bp～700bp的擴增產物和大于700bp且小于等于800bp的擴增產物時，則樣本雞為攜帶有性連鎖矮小基因的雜合雞；

當僅含有600bp～700bp的擴增產物時，則樣本雞為攜帶有性連鎖矮小基因的純合雞；

當僅含有大于700bp且小于等于800bp的擴增產物時，則樣本雞為未攜帶有性連鎖矮小基因的純合雞。

10.權利要求1所述引物組或權利要求3所述試劑或試劑盒或權利要求4～9任一項所述方法在輔助選育矮小雞群新品種中的應用。