[發明專利]一種提高丙戊酸鈉中基因毒性雜質正溴丙烷回收率的分析方法

在審

• 申請號: 202110859304.3
• 申請日: 2021-07-28
• 公開（公告）號: CN113624867A
• 公開（公告）日: 2021-11-09
• 發明（設計）人: 李朝陽;熊狀;劉萍
• 申請（專利權）人: 四川健能制藥有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 重慶輝騰律師事務所 50215
• 代理人: 王海軍;盧勝斌

本發明提供一種提高丙戊酸鈉中基因毒性雜質正溴丙烷回收率的分析方法，本發明公開了一種提高丙戊酸鈉中基因毒性雜質正溴丙烷回收率的分析方法。本方法采用氣相色譜法，以二甲基聚硅氧烷為固定液的毛細管色譜柱(AgilentDB?1，規格：30m×0.32mm，5.0μm)，載氣為氮氣，柱流速為3.0ml/min，分流比為5:1，采用標準加入法測定；能有效解決丙戊酸鈉中正溴丙烷檢測回收率偏低的問題。本方法靈敏度高、重復性好、回收率高，能保證樣品中基因毒性雜質正溴丙烷準確、有效的檢出。

技術領域

本發明涉及測定鹵代烷烴類基因雜質分析方法的技術領域，特別涉及一種提高丙戊酸鈉中基因毒性雜質正溴丙烷回收率的分析方法。

背景技術

鹵代烷是在藥物合成過程中經常使用到的烷基化試劑，含有一個或者多個鹵原子的化合物，結構種類繁多，可以分為氟代烷、氯代烷、溴代烷和碘代烷，是基因毒性雜質中最為常見的一類。鹵代烷烴的反應活性較強，能直接與生物大分子，如DNA、RNA及蛋白質發生烷基化反應，從而導DNA的突變。

正溴丙烷是丙戊酸鈉合成過程中使用的起始原料之一，正溴丙烷可以作為殘留雜質存在于最終藥物中。根據其作為伯烷基鹵化物的結構，正溴丙烷是具有潛在的致癌雜質。正溴丙烷的化學結構如下所示。

丙戊酸鈉為一種不含氮的廣譜抗癲癇藥。本品對多種方法引起的驚厥，均有不同程度的對抗作用。對人的各型癲癇如對各型小發作、肌陣攣性癲癇、局限性發作、大發作和混合型癲癇均有效。口服吸收快而完全，主要分布在細胞外液，在血中大部分與血漿蛋白結合。多用于其它抗癲癇藥無效的各型癲癇病人，尤以小發作為最佳。

丙戊酸鈉口服溶液作為抗癲癇藥，其作用機理尚未完全闡明。實驗見本品能增加GABA的合成和減少GABA的降解，從而升高抑制性神經遞質γ-氨基丁酸(GABA)的濃度，降低神經元的興奮性而抑制發作；在電生理實驗中見本品可產生與苯妥英相似的抑制Na⁺通道的作用，對肝臟有損害。

目前氣相測定微量雜質的方法大部分采用外標法或內標法測定，特別是丙戊酸鈉中鹵代烷烴類采用常規測定方法靈敏度和回收率普遍偏低，靈敏度不高，回收一般在50％～70％左右；原因為一方面由于鹵代烷烴類雜質限度控制較低，另一方面由于受基質效應影響回收率，從而影響樣品中雜質的檢出；由于分析方法的靈敏度和回收率偏低，容易導致樣品中微量的基因雜質無法檢出的風險，影響藥物的臨床安全性，本發明采用上述色譜條件和標準加入法測定能有效解決上述問題，從而保證樣品中微量的基因毒性雜質能準確、有效的檢出。

發明內容

為解決上述技術問題，本發明提供一種靈敏度高、重復性好、回收率高的檢測方法，可應用于丙戊酸鈉中基因毒性雜質的控制。

本發明人一方面經過對升溫程序等色譜條件研究篩選，另一方面通過采用標準加入法對對照品及供試品溶液配制方法，包括樣品、對照品的加入量及體積的研究篩選，氯化鈉用量及加入方式的研究篩選，達到了上述發明的目的。

本發明實施例首先提供一種提高丙戊酸鈉中基因毒性雜質正溴丙烷回收率的分析方法，所述方法采用氣相色譜法進行測定，所述氣相色譜法的色譜條件如下。

采用氣相色譜法，以二甲基聚硅氧烷為固定液的毛細管色譜柱，FID檢測器，選用適當的分流比和升溫程序，采用標準加入法測定。

以二甲基聚硅氧烷為固定液的毛細管色譜柱(Agilent DB-1，規格：30m×0.32mm，5.0μ m)。

所述采用FID檢測器。

所述分流比為5:1。

升溫程序為起始溫度40℃，維持15分鐘，以每分鐘30℃的速率升溫至220℃，維持10分鐘；進樣口溫度為220℃；檢測器溫度為250℃；頂空瓶平衡溫度為80℃，平衡時間為20分鐘。