[發(fā)明專利]一種測(cè)定SPH3127有關(guān)物質(zhì)的方法

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• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110856551.8
• 申請(qǐng)日: 2021-07-28
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN113655155A
• 公開(kāi)（公告）日: 2021-11-16
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 任賢金
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 任賢金
• 主分類號(hào): G01N30/06
• 分類號(hào): G01N30/06;G01N30/02;G01N30/34
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

本發(fā)明公開(kāi)了一種檢測(cè)SPH3127有關(guān)物質(zhì)的方法，以含親水基團(tuán)C18柱為色譜柱，以0.05%的三氟乙酸為流動(dòng)相A：乙腈溶液為流動(dòng)相B，按梯度洗脫（75%流動(dòng)相A保持3分鐘；3~20分鐘，流動(dòng)相A梯度至10%，保持3分鐘；23~25分鐘，流動(dòng)相A梯度至75%；保持5分鐘）；流速為0.7ml/min；柱溫為30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為320nm，運(yùn)行時(shí)間為30分鐘；采取外標(biāo)法進(jìn)行檢測(cè)。本發(fā)明通過(guò)優(yōu)化流動(dòng)相組成及梯度時(shí)間，保證主峰峰形勿拖尾，提高理論塔板數(shù)，保證主峰不受其他雜質(zhì)干擾及雜質(zhì)與雜質(zhì)之間不受干擾；同時(shí)優(yōu)化波長(zhǎng)選擇，讓方法能檢測(cè)到更多的雜質(zhì)。通過(guò)調(diào)整優(yōu)化稀釋劑，找到了一種適合溶解該樣品的溶劑。

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種測(cè)定SPH3127有關(guān)物質(zhì)的方法，屬于化學(xué)檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

SPH3127，曾用名3025469，其結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖1。

化學(xué)式為C₂₀H₁₈F₃N₃O₃，化學(xué)名為2,2-二甲基-3-(4-(5-(5-(三氟甲基)-1H-咪唑-2-基)吡啶-2-基) 苯氧基)丙酸，CAS：1382998-76-6。該藥為新一代口服非肽類小分子腎素抑制劑，通過(guò)對(duì)腎素的直接抑制，拮抗由腎素-血管緊張素-醛固酮系統(tǒng)(RAAS)過(guò)度激活造成的血壓上升。該藥為新作用機(jī)制的降壓藥物。本品已完成臨床II期試驗(yàn)，臨床Ⅲ期正在準(zhǔn)備中。按照現(xiàn)有 NMPA規(guī)定的分類方法，該藥為1類新藥。該化合物為新合成的物質(zhì)，沒(méi)有建立過(guò)使用液相檢測(cè)有關(guān)物質(zhì)的方法。所涉及到的雜質(zhì)結(jié)構(gòu)式見(jiàn)圖2～圖10。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明要解決的技術(shù)問(wèn)題如下：

1)克服了樣品溶解差的問(wèn)題。按照中國(guó)藥典對(duì)溶解度的劃分規(guī)則，該化合物在乙腈和甲醇中均極微溶解，在水中不溶，我們通過(guò)將乙腈和水按不同比例混合，發(fā)現(xiàn)在乙腈-水 (70:30)時(shí)，該化合物溶解度最大，然后將水換成0.005M的鹽酸溶液，溶解的效果更好，能夠滿足樣品溶解需求，從而找到了適合溶解樣品的溶劑；

2)克服了分離難度大及峰拖尾的問(wèn)題。本樣品需要分離的雜質(zhì)眾多，且雜質(zhì)與雜質(zhì)之間及雜質(zhì)與本品結(jié)構(gòu)類似，分離難度大，且在乙腈-水體系中峰拖尾較嚴(yán)重，該化合物為帶氟的羧酸，針對(duì)這一特點(diǎn)，如是在水溶液中加入0.05％的三氟乙酸，同時(shí)調(diào)節(jié)流動(dòng)相梯度比例，找到了合適的樣品保留時(shí)間，使得樣品能與各雜質(zhì)有良好的分類。

為了解決上述技術(shù)問(wèn)題，本發(fā)明提供了如下的技術(shù)方案：

一種測(cè)定SPH3127有關(guān)物質(zhì)的方法，包括以下步驟：

對(duì)照品溶液制備：分別取SPH3127對(duì)照品、IMP1對(duì)照品、IMP2對(duì)照品、IMP3對(duì)照品、IMP4對(duì)照品、IMP5對(duì)照品、IMP6對(duì)照品、IMP7對(duì)照品各適量，精密稱定于同時(shí)容量瓶?jī)?nèi)，乙腈-0.005M的鹽酸溶液(70:30)的溶液溶解，超聲，并稀釋成每1mL中約含本品0.5μg的溶液，搖勻，做為對(duì)照品溶液；

供試品溶液制備：取本品適量，精密稱定，用乙腈-0.005M的鹽酸溶液(70:30)的溶液溶解，超聲，并稀釋成每1mL中約含本品0.5mg的溶液，搖勻，做為供試品溶液；

以Agilent Zorbax Bonus RP(150*4.6mm，3.5μm)為色譜柱，以0.05％的三氟乙酸為流動(dòng)相 A：乙腈溶液為流動(dòng)相B，洗脫梯度見(jiàn)表1；流速為0.7ml/min；柱溫為30℃；檢測(cè)波長(zhǎng)為 320nm，運(yùn)行時(shí)間為30分鐘；

精密量取對(duì)照品溶液10μl，注入液相色譜儀，對(duì)照溶液中，SPH3127峰與各雜質(zhì)峰以及雜質(zhì)峰與雜質(zhì)峰之間的分離度均應(yīng)大于1.5，6針對(duì)照溶液中，SPH3127峰的峰面積及各雜質(zhì)的峰面積的相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差均應(yīng)≤5.0％，精密量取供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，按洗脫梯度記錄色譜圖至30分鐘，按外標(biāo)法以峰面積計(jì)算，已知雜質(zhì)應(yīng)≤0.15％，未知最大單雜應(yīng)≤0.10％，總雜應(yīng)≤1.0％。