[發(fā)明專利]一種吸入式肺表面活性劑納米仿生體的制備方法及其應(yīng)用

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 202110854486.5
• 申請(qǐng)日: 2021-07-28
• 公開（公告）號(hào): CN113559065B
• 公開（公告）日: 2022-06-14
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王兵華;王明金;李靜;張紅嶺;孫露露;李夢(mèng)茹
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 鄭州大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K9/127
• 分類號(hào): A61K9/127;A61K9/72;A61K31/4418;A61P11/00;B82Y5/00;B82Y40/00;A61K31/122
• 代理公司: 鄭州天陽專利事務(wù)所(普通合伙) 41113
• 代理人: 聶孟民

1.一種吸入式肺表面活性劑納米仿生體的制備方法，其特征在于，采用納米仿生技術(shù)，以肺表面活性劑功能性成分為材料，模擬肺表面活性劑在肺泡表面的多膜結(jié)構(gòu)，利用薄膜分散法制備肺表面活性劑納米仿生體，同時(shí)在其脂質(zhì)層負(fù)載活性氧清除劑蝦青素，內(nèi)核中包載抗肺纖維化藥物吡非尼酮，構(gòu)建具有修復(fù)、治療一體化的納米藥物遞送系統(tǒng)的吸入式肺表面活性劑納米仿生體，具體包括以下步驟：

（1）將5～30mg的二棕櫚酰磷脂酰膽堿、2～10mg膽固醇、3～20mg卵磷脂三種脂質(zhì)材料分別溶于5～30mL氯仿中，然后將配制的溶液渦旋震蕩混勻，保存放于4℃?zhèn)溆茫环Q取5～10mg蝦青素溶于氯仿，配制成濃度為2～3mg/mL蝦青素溶液；

（2）按照質(zhì)量比二棕櫚酰磷脂酰膽堿：膽固醇：卵磷脂=6:1:3的比例取步驟（1）中配制好的相應(yīng)脂質(zhì)材料溶液以及蝦青素溶液置入瓶中，在43℃、壓強(qiáng)0.05-0.06Kpa的條件下進(jìn)行旋蒸，除去溶劑，瓶?jī)?nèi)壁得到一層均勻的白色薄膜，加入2mL濃度為2mg/mL吡非尼酮水溶液水化，將得到的溶液轉(zhuǎn)移至離心管；

（3）將步驟（2）中離心管內(nèi)的溶液利用超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)進(jìn)行冰浴探超處理，探超條件為：工作5s，間歇6s，總工作時(shí)間2min，功率100W，使其形成單層囊泡；

（4）將步驟（3）得到的單層囊泡溶液中加入400～500μL濃度為2mg/mL的Ca²⁺溶液，進(jìn)行渦旋5min，再冰浴探超，冰上以100W功率，探超2min，兩者交替進(jìn)行1h，得肺表面活性劑納米仿生體。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吸入式肺表面活性劑納米仿生體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將17.5mg的二棕櫚酰磷脂酰膽堿、6mg膽固醇、11.5mg卵磷脂三種脂質(zhì)材料分別溶于27.5mL氯仿中，然后將配制的溶液渦旋震蕩混勻，保存放于4℃?zhèn)溆茫环Q取7.5mg蝦青素溶于氯仿，配制成濃度為2.5mg/mL蝦青素溶液；

（2）按照質(zhì)量比二棕櫚酰磷脂酰膽堿：膽固醇：卵磷脂=6:1:3的比例取步驟（1）中配制好的相應(yīng)脂質(zhì)材料溶液以及蝦青素溶液置入瓶中，在43℃、壓強(qiáng)0.055Kpa的條件下進(jìn)行旋蒸，除去溶劑，瓶?jī)?nèi)壁得到一層均勻的白色薄膜，加入2mL濃度為2mg/mL吡非尼酮水溶液水化，將得到的溶液轉(zhuǎn)移至離心管；

（3）將步驟（2）中離心管內(nèi)的溶液利用超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)進(jìn)行冰浴探超處理，探超條件為：工作5s，間歇6s，總工作時(shí)間2min，功率100W，使其形成單層囊泡；

（4）將步驟（3）得到的單層囊泡溶液中加入450μL濃度為2mg/mL的Ca²⁺溶液，進(jìn)行渦旋5min，再冰浴探超，冰上以100W功率，探超2min，兩者交替進(jìn)行1h，得肺表面活性劑納米仿生體。

3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的吸入式肺表面活性劑納米仿生體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

（1）將20.3mg的二棕櫚酰磷脂酰膽堿、5.8mg膽固醇、12.4mg卵磷脂三種脂質(zhì)材料分別溶于5mL氯仿中，然后將配制的溶液渦旋震蕩混勻，保存放于4℃?zhèn)溆茫环Q取5.2mg蝦青素溶于氯仿，配制成濃度為2.6mg/mL蝦青素溶液；

（2）按照質(zhì)量比二棕櫚酰磷脂酰膽堿：膽固醇：卵磷脂=6:1:3的比例取步驟（1）中配制好的相應(yīng)脂質(zhì)材料溶液以及蝦青素溶液置入茄形瓶中，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀水浴鍋在43℃、壓強(qiáng)0.05-0.06Kpa的條件下進(jìn)行旋蒸，除去溶劑，茄形瓶?jī)?nèi)壁得到一層均勻的白色薄膜，加入2mL濃度為2mg/mL吡非尼酮水溶液水化，將得到的溶液轉(zhuǎn)移至離心管；

（3）將步驟（2）中離心管內(nèi)的溶液利用超聲波細(xì)胞粉碎機(jī)進(jìn)行冰浴探超處理，探超條件為：工作5s，間歇6s，總工作時(shí)間2min，功率100W，使其形成單層囊泡；

（4）將步驟（3）得到的單層囊泡溶液中加入400μL濃度為2mg/mL的Ca²⁺溶液，進(jìn)行渦旋5min，再冰浴探超，冰上以100W功率，探超2min，兩者交替進(jìn)行1h，得肺表面活性劑納米仿生體。