[發明專利]一種以多花黃精莖節培育組培苗的方法

在審

• 申請號: 202110854427.8
• 申請日: 2021-07-28
• 公開（公告）號: CN113412788A
• 公開（公告）日: 2021-09-21
• 發明（設計）人: 石云平;許娟;覃永嬡;蘇祖祥;李小泉
• 申請（專利權）人: 廣西壯族自治區農業科學院
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 桂林市華杰專利商標事務所有限責任公司 45112
• 代理人: 楊雪梅

本發明公開了一種以多花黃精莖節培育組培苗的方法，以多花黃精莖節為外植體，在初代誘導培養和繼代增殖培養階段，帶莖葉的芽還可以剪成帶節間的莖段進行叢生芽誘導，進一步提高增殖系數，通過壯苗培養使芽保持帶莖葉的成苗狀態，再進行生根結塊莖培養，最終獲得帶莖葉的多花黃精組培苗，假植1?3個月就可以移栽到大田種植，大大縮短了育苗時間，節省假植移栽的時間和場地，降低了育苗成本。本發明方法，依據植物組培技術保持原作物所有性狀的特點，抽出莖作為多花黃精大苗的標志，且莖節取材容易，滅菌易過關，不傷植株的塊莖，植株還可以正常生長和收獲，對于多花黃精產業的發展具有重大意義。

技術領域

本發明涉及植物組織培養領域，具體是一種以多花黃精莖節培育組培苗的方法。

背景技術

多花黃精(Polygonatumcyrtonema Hua)為百合科黃精屬多年生草本植物，是我國大宗的藥食兩用中藥材，性平、味甘，入脾、腎、肺經，具有補腎益精、寬中益氣、滋陰潤燥、生津補脾之功效，長期用于治療腎虛虧損，脾胃虛弱，肺虛燥咳，體倦乏力等癥，也可用于治療心血管疾病、結核病、慢性肝炎、心悸氣短、久病津虧口干、糖尿病、高血壓等病癥，是150種中成藥的重要組分，應用非常廣泛。

多花黃精分布于長江以南大部分地區，雖然分布范圍廣，但由于藥用資源仍以野生資源為主。隨著人們生活水平提高，更加注重健康養生，多花黃精對許多現代慢性病有很好的治療效果，且無毒副作用，可長期服用，導致市場需求量急劇增加，野生資源被亂采濫挖現象嚴重，野生蘊藏量急劇下降，人工栽培勢在必行。

近年來，多花黃精開始了人工栽培，種苗主要是以種子苗和塊莖苗為主。多花黃精種子雖多，但種子育苗的時間非常長，需要生長3年小苗才抽出帶葉的莖成大苗，移栽到大田種植成活率才有保障。塊莖苗的種源混雜，且存在病毒積累導致種性退化、易感病等問題，塊莖運輸易造成機械傷而腐爛，收獲的產量和質量參差不齊。

植物組培技術具有提純復壯、短時間內能生產大量種苗等優點，在作物種苗繁育中廣泛應用。許多學者研究了黃精、多花黃精及滇黃精等黃精屬植物的組培快繁技術研究，主要是以塊莖上新芽或種子為外植體，由于植物組培技術具有保持原作物所有性狀的特點，而種子或塊莖芽處于多花黃精生長的幼苗期，導致即使是帶有塊莖的組培苗出瓶后，還需要1年時間的假植才能成為抽出莖的大苗，雖然比種子苗時間短2年，但比其它作物組培苗育苗時間長，因此，多花黃精的組培苗應用受到了很大限制。而且多花黃精的塊莖新芽被切除后基本上不能再長芽，這個塊莖不能作為種莖，只能作為藥材使用，加上塊莖芽生長在土壤里，微生物種類繁多，滅菌很難過關，易出內生菌，污染率高，增加組培苗的成本。

發明內容

本發明針對多花黃精育苗時間長的問題，提出一種以多花黃精莖節培育組培苗的方法。該方法以多花黃精莖節為外植體，在初代誘導培養和繼代增殖培養階段，帶莖葉的芽還可以剪成帶節間的莖段進行叢生芽誘導，進一步提高增殖系數，通過壯苗培養使芽保持帶莖葉的成苗狀態，再進行生根結塊莖培養，最終獲得帶莖葉的多花黃精組培苗，假植1-3個月就可以移栽到大田種植，大大縮短了育苗時間，節省假植移栽的時間和場地，降低了育苗成本。

實現本發明目的的技術方案是：

一種以多花黃精莖節培育組培苗的方法，包括以下步驟：

（1）外植體取材及預處理：取多花黃精幼嫩的莖芽，剪掉葉片，用洗衣粉水浸泡，不時攪拌，再用流動清水沖洗干凈，濾干水滴，備用；

（2）滅菌及初代誘導培養：在超凈工作臺上，將多花黃精莖剪成帶節間1 cm長的莖段，用0.1%升汞（HgCL₂)溶液滅菌處理，無菌水清洗干凈，放到滅菌過的濾紙上吸干水分，剪去兩頭的舊傷口，接入初代誘導培養基上培養30 天，芽誘導率為62.1%～95.80%；

所述初代誘導培養基為：MS+6-BA0.5～2.0mg/L+ZT0.1～0.7mg/L + TDZ0.1～0.5mg/L+IAA0.01～0.1 mg/L+谷氨酰胺0.2 mg/L+白糖30 g/L+瓊脂5 g/L，pH值為5.8；